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重组和转座第一节重组的分类二、位点特异性重组三、转座:四、模板选择(copychoice)性重组第二节同源重组第三节转座(transposition)一、原核转座子的类型InsertionsequenceshaveinvertedterminalrepeatsandgeneratedirectrepeatsofflankingDNAatthetargetsite. 2.复合转座子(Compositetransposons): 含有一个中心序列和位于两侧的臂(arm); 除了和自身转座有关的基因外,中心序列含有抗药性基因等遗传信息; 复合转座子两端的臂由IS序列组成。Acompositetransposonhasacentralregioncarryingmarkers(suchasdrugresistance)flankedbyISmodules.3.TnA家族:二.转座机制:根据转座子的机制,转座可分成三种不同的类型2.非复制型转座(nonreplicativetransposition) Nonreplicativetranspositionallowsatransposontomoveasaphysicalentityfromadonortoarecipientsite.Thisleavesabreakatthedonorsite,whichislethalunlessitcanberepaired. 3.保守转座(conservativetransposition) Conservativetranspositioninvolvesdirectmovementwithnolossofnucleotidebonds 1.非复制转座: 转座子插入到DNA上新的位点,首先交错切开靶DNA,再将转座子连接到靶DNA的凸出单链上,最后填补空缺完成转座。 复制型转座: 在转座子和靶位点两端分别交错切割产生切口; 转座子和靶位点的切口末端交互连接(a-f,g-d),形成一种交换结构(crossstructure); 以游离的3’末端作为引物进行复制,产生一个包含两个正向重复的转座子拷贝的复合物,称为共合体(cointegrate),这一过程在转座酶作用下进行;转座子的两个拷贝在res(siteofresolution)位点发生重组,释放两个复制子。这一过程称为拆分(Resolution),在解离酶的作用下进行。 第四节真核生物的转座因子 若玉米带有野生型C基因,则胚乳呈紫色; C基因的突变阻断了紫色素的合成,那么胚乳呈白色; 在胚乳发育的过程中,突变发生回复导致斑点的产生,回复突变发生在早期发育阶段,紫斑就比较大; McClintock推测原来的C突变(无色素)是由一个“可移动的控制因子”引起的,称解离因子(dissociator,Ds),它可以插入到C基因中(即转座)。 另一个可移动的控制因子是激活因子(activator,Ac),它的存在可激活Ds转座,进入C基因或其他基因,也能使Ds从基因中转出,使突变基因产生“回复突变”,这就是Ac-Ds系统“Wearesadlyignorantoftheorganizationofthechromosomeandofthepossibletypesofchangesinthisthatmayoccurtothechromosomeasawholeoratthelocuslevel”. BarbaraMcClintock “…thatwashardlypossiblebeforethescienceofmolecularbiologycaughtupwithMcClintock” JoshuaLederberg (1925-2008,1958nobelLaureate)