第3章核酸的化学ppt课件.ppt

第三章核酸的化学11868年，F.Miescher从脓细胞核中分离得到一种酸性物质，即现在被称为核酸的物质。认知核酸一、元素组成
嘌呤——次黄嘌呤、1-甲基次黄嘌呤、7-甲基鸟嘌呤、6-甲基腺嘌呤等

嘧啶——5-甲基胞嘧啶、5-羟甲基胞嘧啶、二氢尿嘧啶、4-巯尿嘧啶等戊糖磷酸核酸（三）核苷酸的组成核苷核苷酸RNA三、核苷酸的衍生物环化核苷酸辅酶类核苷酸一、核酸的一级结构
主键为3ˊ,5ˊ-磷酸二酯键
主链为重复的结构单元（磷酸—戊糖）
侧链为特征结构—碱基
具有严格的方向性：5ˊ→3ˊ二、DNA分子的空间结构（一）DNA分子的二级结构DNA分子由两条反向平行的多核苷酸链以右手螺旋方式围绕一假想的中心轴形成双螺旋结构。碱基位于螺旋内部，碱基平面与中心轴垂直；脱氧核糖和磷酸基团形成螺旋的骨架，位于螺旋的外侧。
两条链上位于同一平面的碱基按照互补规律缔合形成碱基对，G与C配对形成三个氢键，A与T配对形成两个氢键。
螺旋的每一周包含10个碱基对，相邻碱基对的距离为0.34nm，螺距为3.4nm。螺旋直径为2nm。
双螺旋结构的维系力包括：①氢键：维系双螺旋结构横向稳定；②碱基堆积力：碱基之间层层紧密堆积，形成疏水型核心，保持双螺旋结构纵向稳定。③离子键：磷酸残基阴离子与介质中的阳离子形成离子键，可降低双链间的静电排斥力。5´双螺旋中的大沟对于DNA和蛋白质结合时的相互识别很重要，在沟内可以辨认碱基的顺序。DNA双螺旋的类型（二）DNA分子的高级结构核小体、染色质和染色体
真核生物染色体DNA组装不同层次的结构三、RNA分子的结构与功能（一）mRNA
mRNA的功能是将细胞核中基因信息转录后携带出来，作为指导蛋白质生物合成的直接模板。
真核细胞生物的mRNA是由其前体核不均一RNA（hnRNA）剪接而成。
真核细胞成熟mRNA的结构特点：
（1）5ˊ端帽子结构：5ˊ-末端在成熟过程中会加上7-甲基鸟嘌呤核苷三磷酸（m7Gppp），称为“帽子”结构。该结构与mRNA的稳定性有关，并与其转运出细胞核、与核糖体结合以及与蛋白质生物合成的起始等过程都有一定的关系。（2）3ˊ端多聚腺苷酸尾部：3ˊ-末端有一段20～200个腺苷酸的多聚腺苷酸尾部（polyA），与mRNA的稳定性和转运出细胞核的过程等有关。（二）tRNA1氨基酸臂与反密码环分别位于“倒L”型分子的两端，DHU环与TψC环位于拐角上。
主要依靠碱基堆积力和氢键维系，紧凑而稳定。（三）rRNA核蛋白体的组成项目一、核酸的分子大小、粘度、溶解性、酸碱性质二、核酸的紫外吸收在一定理化因素作用下，DNA双螺旋结构中碱基之间的氢键断裂，变成单链的现象称为DNA变性
在适当的条件下，两条互补单链重新结合并恢复天然的双螺旋结构，称为复性（renaturation）
热变性的DNA缓慢冷却后复性称为退火。
增色效应：当核酸变性或降解时260nm处光吸收值显著增加的现象。
减色效应：核酸复性后，260nm处光吸收值又恢复到原有水平的现象。
加热变性时DNA溶液A260升高达到最大值一半时即DNA解链50%时的温度称为该DNA的熔点或熔解温度（meltingtemperatureTm）。G＋C比例高，Tm值高。

四、分子杂交与探针技术第4节核酸类药物的工业生产一、核酸的提取二、核酸的分离纯化三、核酸含量的测定四、核酸类药物制备实例