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酸凝乳的扫描电镜样品制备方法 酸凝乳作为一种具有多种生物活性成分的乳制品,在人们的日常生活中得到了广泛应用。为了深入了解酸凝乳的结构和组成,需要对其进行扫描电镜分析。本文就酸凝乳的扫描电镜样品制备方法进行探讨。 1.酸凝乳的基本特性 酸凝乳是一种通过加入乳酸菌使牛乳或豆奶等发酵产生的乳制品。酸凝乳的特点是香味浓郁,质地细腻,口感酸甜适中,并富含蛋白质、碳水化合物、维生素和矿物质等营养成分。这些特性也为酸凝乳的样品制备提供了基础。 2.制备酸凝乳的样品 为制备酸凝乳的扫描电镜样品,首先需要准备好酸凝乳样品。具体方法是取适量的酸凝乳,转移到离心管中进行离心。然后,取上清液加入甲醛(finalconc.2.5%),再在冰箱中保存过夜,用PBS(0.1M普通磷酸盐缓冲液)洗涤三次,共30分钟,最后将样品离心至5000g,继续用PBS洗涤三次。 3.制备样品的前处理 制备好酸凝乳的样品后,需要进行前处理。前处理的目的是使样品表面充分暴露,便于扫描电镜对样品进行观察。具体操作如下: (1)将样品切成4mm左右的小块,然后取100μl的甲醛(finalconc.2.5%)加入样品中,gentlymix并封闭样品离心管,冰箱保存12小时; (2)取出离心管,用PBS洗涤2次,每次5分钟,室温; (3)取200μl的荧光素红pH7.5~8.0的缓冲液加入样品中,封闭样品离心管,并在4℃下暗室处理1小时; (4)取出离心管,用PBS洗涤3次,每次5分钟,室温; (5)取200μl的氧化银缓冲液加入样品中,离心样品离心管30分钟,抽取上清液并在室温下放置30分钟; (6)取出上清液,用纯水洗涤3次,每次5分钟,室温。 4.扫描电镜观察样品 制备好样品后,即可进行扫描电镜观察。通过扫描电镜的高放大倍率下对样品的观察可检验酸凝乳的结构和功能,以及其成分和组成等性质。在扫描电镜观察时,需要注意以下几点: (1)样品的表面应该较为平整,便于观察; (2)需要定期对扫描电镜进行清洗和校准,以保证图像的清晰度和准确性; (3)在扫描电镜观察过程中需要特别注意样品的电荷,避免电荷干扰。 综上所述,制备酸凝乳的扫描电镜样品需要进行前期的基本处理,包括去除酸凝乳中的杂质,同时提高样品的表面光滑度和稳定性,使其便于扫描电镜的观察。通过这些方法,可以更加准确地检测酸凝乳的结构和成分,并为工业生产和应用提供更为精确的数据支持。