气相色谱分析PPT课件.ppt

气相色谱分析 国产气相色谱仪 图1、色谱过程图2、色谱图 色谱图界面 色谱过程的基本方程式： 有效塔板数（neff）的计算公式为； 另 毛细管柱 高效液相色谱法：
特指一种用液体为流动相的色谱分离分析方法。它在经典色谱理论的基础上，采用了高压泵、化学
键合固定相高效分离柱、高灵敏专用检测器等新实
验技术建立的一种液相色谱分析法。
高压：150-350*105Pa
高效：大于30000塔板/米
高灵敏：10-9g（紫外检测）、10-11g（荧光检测）一、HPLC与GC差别2．流动相差别的区别
GC：流动相为惰性，气体组分与流动相无亲合作用
力，只与固定相有相互作用。
HPLC：流动相为液体，流动相与组分间有亲合作用
力，能提高柱的选择性、改善分离度，对分离起
正向作用。且流动相种类较多，选择余地广，改
变流动相极性和pH值也对分离起到调控作用，当
选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相
也可以增大分离选择性。
3．操作条件差别
GC：加温操作
HPLC：室温；高压（液体粘度大，峰展宽小）
三、HPLC的特点和实际应用§2-2基本理论和条件选择1.2）涡流扩散项及其影响3）传质阻抗项及其影响1．1.固定相与装柱方法的选择：
选粒径小的、分布均匀的球形固定相
（dp≤10μm）
首选化学键合相，匀浆法装柱
2.流动相及其流速的选择：
选粘度小、低流速的流动相——甲醇，
约1ml/min
3.柱温的选择：
选室温250C左右一、液固吸附色谱法（LSC）
(liquid-solidadsorptionchromatography)
二、液液分配色谱法（LLC）
(liquid-liquidpartitionchromatography,
chemicalbondedphasechromatography
三、离子色谱法（IC）
（ion-exchangechromatographyand
ionpairchromatography)
四、空间排阻色谱法（SEC）
（stericexclusionchromatography
1．分离机制：利用溶质分子占据固定相表面吸附
活性中心能力的差异2．固定相：与LC比，固定相粒径不同（<10μm）3．流动相：底剂（烷烃）+有机极性调节剂
例：正己烷或庚烷+氯仿---1．分离机制：利用组分在两相中溶解度的差异
2．固定相：载体+固定液（物理或机械涂渍法）
缺点：系统内部压力大，易流失，不实用
固定液——极性→NLLC
固定液——非极性→RLLC
3．正相色谱——固定液极性>流动相极性（NLLC）
极性小的组分先出柱，极性大的组分后出柱
适于分离极性组分
反相色谱——固定液极性<流动相极性（RLLC）
极性大的组分先出柱，极性小的组分后出柱
适于分离非极性组分（一）常规化学键合相（二）反相键合相固定相4．流动相极性与k的关系：
流动相极性↑，洗脱能力↓，k↑，组分tR↑
5．出柱顺序：极性大的组分先出柱
极性小的组分后出柱
6．适用：非极性~中等极性组分（HPLC80%问题）4．流动相极性与k的关系：
流动相极性↑，洗脱能力↑，组分tR↓，k↓
5．出柱顺序：结构相近组分，极性小的组分先
出柱极性大的组分后出柱
6．适用：
氰基键合相与硅胶的柱选择性相似（极性稍小）
分离物质也相似
氨基键合相与硅胶性质差别大，碱性
分析极性大物质、糖类等1．反相离子对色谱法（IPC或PIC）2．反相离子抑制色谱2．对流动相的要求：3．洗脱方式§2-4高效液相色谱仪液相色谱3．色谱柱：直径4~6mm,柱长10~30cm
柱效评价：色谱系统适应性试验
R，n，fs（拖尾因子）
柱再生：维护、保养、柱子的冲洗
4．检测器
1）紫外检测器：适于吸收紫外光的物质
2）荧光检测器：只能分析自身发光的物质
灵敏度高
3）示差折光检测器：利用折光率的差别
灵敏度低，温度要求严格
4）电化学检测器
5）化学发光