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基于环介导等温扩增的志贺菌快速检测方法的建立
摘要：
本研究旨在建立一种基于环介导等温扩增的志贺菌快速检测方法。该方法利用环介导酶结合核酸小分子的特性，在等温条件下实现了快速的扩增反应。同时，为了提高检测的特异性和灵敏度，我们设计了多组引物和探针，对反应体系进行了优化。最终，该方法在实验室验证能够可靠地检测到各种含有志贺菌的样品。这种方法检测速度快、灵敏度高、特异性好，有望应用于志贺菌的快速筛查和诊断。
关键词：环介导等温扩增；志贺菌；快速检测
引言：
志贺菌是一种引起人类疾病的重要致病菌，主要引起腹泻和出血性结肠炎等疾病。在我国，每年有大量的腹泻病例和志贺菌感染病例。快速、准确地检测志贺菌对于诊断病情和控制疫情非常重要。传统的检测方法包括细菌培养、免疫学方法和PCR等，但这些方法通常需要耗时耗力，且具有一定的局限性。因此，需要发展一种快速、可靠的志贺菌检测方法。
材料与方法：
1.环介导等温扩增
在本研究中，我们使用BstDNA聚合酶作为环介导酶，结合核酸小分子，实现了等温扩增反应。扩增反应的温度为60℃，反应时间为60min。
2.引物和探针的设计
我们设计了多组引物和探针，选取了志贺菌的特异位点进行了优化，在反应体系中进行了筛选和优化。
3.样品的收集和处理
收集了不同来源的含有志贺菌的样品，包括食品、水和粪便等，进行处理和样品制备。
4.电泳分析和比色法分析
我们分别使用电泳分析和比色法分析样品中是否存在志贺菌。
结果：
通过对反应体系的优化和引物和探针的设计，我们建立了一种基于环介导等温扩增的志贺菌快速检测方法。该方法在实验室验证能够可靠地检测到各种含有志贺菌的样品。其中，电泳分析结果显示扩增片段与目标片段的大小相符，比色法分析结果显示含有志贺菌的样品的颜色变化。此外，我们还比较了该方法与PCR方法的检测结果，结果显示该方法的特异性和灵敏度均优于PCR方法。
结论：
我们成功地建立了一种基于环介导等温扩增的志贺菌快速检测方法，该方法具有检测速度快、灵敏度高、特异性好等特点。我们相信该方法有望应用于志贺菌的快速筛查和诊断，为控制和预防志贺菌感染提供了一种新的方法和手段。