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第二次实验内容 一、显微镜示教:(附图片) 二、实物示教: 1、比较金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌的区别 2、溶血性链球菌菌落的特点 3、肠道杆菌在ss培养基上菌落的特征 4、真菌菌落类型 5、抗链球菌溶血素“O”抗体试验 6、肥达试验(试管定量凝集反应) 三、动物实验---破伤风外毒素的致病作用及破伤风抗毒素的保护(示教) 附:抗酸性染色法步骤(操作示教) G-,肾形,成双排列, 流脑的病原菌白喉杆菌(放大1000倍)结核杆菌 (痰液涂片)钩端螺旋体 (放大1000倍)梅毒螺旋体 (放大1000倍)普通平板上金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌的比较血平板上金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌的区别金黄色葡萄球菌的菌落特点表皮葡萄球菌的菌落 血浆凝固酶试验2观察乙型溶血性链球菌的菌落溶血性链球菌菌落的特点: 3、肠道杆菌在ss培养基上菌落的特征: 肠道致病菌:菌落较小,透明无色(或淡黄色) ——乳糖(-) 肠道非致病菌:菌落较大,红色——乳糖(+)SS培养基5、抗链球菌溶血素“O”抗体试验 (抗体中和试验) 原理:溶血性链球菌能产生溶血素“O”,大多患者感染本菌后2-3周到病愈后数月,血清中可查到溶血素“O”抗体(简称抗“O”抗体),可取患者血清检查之。 方法: 溶血素“O”+患者血清+红细胞不溶血(+) 溶血(-) 意义:正常人抗抗体效价在500单位以下,超过此值可 辅助风湿病的诊断。6、肥达试验(试管定量凝集反应) 已知伤寒杆菌H、O抗原病人血清 甲、乙副伤寒杆菌H抗原凝集反应 检查相应抗体含量 有诊断意义的效价:伤寒杆菌抗体1:160肥达试验的原理++++:液体清澈透明,菌体全部被凝集成块,沉于管底 +++:液体较透明,菌体大部分被凝集而沉于管底 ++:液体稍透明,管底有少量凝集沉淀物 +液体较混浊,可见少量凝集沉淀物 —:液体的混浊,无沉淀三、动物实验--破伤风外毒素的致病作用 及破伤风抗毒素的保护 1、毒力实验: 破伤风外毒素(一定量)注射小白鼠肌肉 结果观察:1-2天后,注射部位强直性痉挛,全身肌肉痉挛而死。 2、保护力实验:先给小白鼠注射破伤风抗毒素一段时间后再注射破伤风外毒素,小白鼠不发病。四、抗酸性染色法步骤(操作示教): 初染:5%石炭酸复红4-5滴,微加热3-5min,水洗。 脱色:3%盐酸酒精4-5滴,0.5-1min,水洗。 复染:1%美兰0.5min水洗。 印感、滴油、观察 结果:抗酸性杆菌被染上红色; 非抗酸性杆菌被染上兰色。