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噬菌体分离纯化技术研究进展 噬菌体是一种可以感染细菌并复制自身的病毒。噬菌体可以广泛应用于基因工程、抑菌剂研发、抗菌治疗和食品安全等领域。然而,研究人员在应用噬菌体时面临着一个重要的挑战,即如何有效地进行噬菌体的分离和纯化。本文将介绍噬菌体分离纯化技术的研究进展,并讨论不同方法的优缺点。 噬菌体分离纯化技术的研究进展 噬菌体分离纯化技术的发展可以追溯到20世纪50年代,那时候的技术主要是基于盘子扩散法和硫酸铵沉淀法。随着生物技术的发展,越来越多的新颖方法被引入到噬菌体分离纯化的领域。 一种常用的噬菌体分离纯化技术是差速离心法。差速离心法是利用离心机在不同的离心速度下分离细菌、噬菌体和其他细胞碎片。通过逐渐增加离心速度,可以逐步分离出不同密度的成分。在差速离心过程中,噬菌体会沉淀到离心管的底部,而细菌和其他细胞碎片则会留在上层。这种方法具有快速、简单的优点,但是无法获得高纯度的噬菌体。 为了提高纯度,研究人员还开发了一系列新的纯化方法。其中之一是聚乙二醇(PEG)沉淀法。聚乙二醇是一种水溶性聚合物,可以在低温下与水溶液中的蛋白质和核酸结合形成沉淀。研究人员可以通过添加适当浓度的聚乙二醇来沉淀噬菌体,并将其与其他组分分离开来。这种方法可以获得较高的噬菌体纯度,并且比较适合大规模生产。 此外,还有一种常用的纯化方法是阳离子交换层析法。阳离子交换层析是利用带有阳离子基团的树脂,通过电荷相互作用分离样品中的目标分子。研究人员可以通过适当选择树脂类型和流动相条件,来将噬菌体与其他成分分离开来。阳离子交换层析法具备高分离度、可控性好的优点,适用于小规模实验和中小规模生产。 总结 噬菌体分离纯化技术在过去几十年中取得了长足的进展。差速离心法、聚乙二醇沉淀法和阳离子交换层析法都是常用的纯化方法。差速离心法简单快速,但纯度较低;聚乙二醇沉淀法可以获得较高纯度的噬菌体,适用于大规模生产;阳离子交换层析法具备高分离度和可控性好的特点,适用于小规模实验和中小规模生产。未来,还可以通过结合不同的纯化方法,或者开发新的纯化方法,来提高噬菌体分离纯化的效率和纯度。 参考文献: 1.Nair,G.R.,Khera,E.,&Singhal,R.K.(2016).PhageTherapy:ANewHorizonintheAntibacterialTreatmentofPseudomonasaeruginosaInfections.InM.A.Rahman&M.Mukherjee(Eds.),AntibacterialDrugDiscoverytoCombatMDR(pp.277-294).SpringerInternationalPublishing. 2.Verma,C.,Gaurav,I.,Mukherjee,S.,&Chauhan,A.(2019).Bacteriophagelysins:potentialasantimicrobialsandimmunomodulators.JournalofDrugTargeting,27(4),404-415. 3.Kutter,E.,&Sulakvelidze,A.(2005).Bacteriophages:BiologyandApplications.CRCPress. 4.Lin,D.M.,&Koskella,B.(2019).FriendorFoe:TheInterplaybetweenBacteriophageandItsHost.EmergingTopicsinLifeSciences,3(2),127-136. 5.Riede,I.(2003).Controlofλprophageinduction:specificityversusgeneticeconomy.Gene,310,1-4.