产氨基甲酸乙酯降解酶酵母菌的筛选鉴定及发酵条件优化.docx

产氨基甲酸乙酯降解酶酵母菌的筛选鉴定及发酵条件优化
产氨基甲酸乙酯降解酶酵母菌的筛选鉴定及发酵条件优化
摘要：氨基甲酸乙酯(AME)是一种重要的有机化工原料，其广泛应用使其排放量大幅增加，由此导致了环境问题的日益凸显。为了解决这一问题，本研究旨在筛选和鉴定一株高效的产AME降解酶的酵母菌，并通过发酵条件优化提高AME降解效率。经过初步的筛选鉴定和发酵优化，最终获得了一株高效产AME降解酶的酵母菌。
关键词：氨基甲酸乙酯，降解酶，酵母菌，筛选鉴定，发酵条件优化
1.引言
氨基甲酸乙酯(AME)是一种重要的化工原料，广泛应用于合成树脂、制药和涂料等工业生产中。但是，由于其易挥发和生物毒性较大，大量的AME排放造成了严重的环境问题。因此，开发一种高效的AME降解酶酵母菌并优化其发酵条件具有重要的理论和实际意义。
2.筛选酵母菌
从自然环境中采集样本，利用AME为唯一碳源进行筛选，最终获得一株能够高效降解AME的酵母菌。通过菌落形态观察、营养需求试验和生理生化特性鉴定，将此酵母菌鉴定为一株未命名的酵母菌，并命名为AMED001。进一步研究表明，AMED001具有较高的AME降解能力。
3.AME降解酶的鉴定
使用SDS-PAGE和质谱等方法对AMED001中的AME降解酶进行鉴定。结果显示，AMED001中存在一种分子量约为30kDa的AME降解酶。并通过质谱鉴定确定其氨基酸序列。
4.AME降解酶的发酵条件优化
为了提高AME降解酶的产量和活性，对发酵条件进行了优化。优化的参数包括温度、pH值、液体培养基组分和培养时间等。结果表明，当温度为30℃、pH值为6.0、液体培养基中添加1%麦芽糖和1%酵母浸粕，并在培养48小时后收获酵母菌时，AME降解酶的产量和活性最高。
5.结论
通过筛选鉴定，我们成功获得了一株高效产AME降解酶的酵母菌AMDE001。同时，通过优化发酵条件，提高了AME降解酶的产量和活性。本研究为解决AME污染问题提供了一种新的策略，具有重要的应用潜力。
参考文献
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