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高产菊粉酶菌株的诱变选育及其酶的固定化
高产菊粉酶菌株的诱变选育及其酶的固定化
摘要：
菊粉酶是一种能够水解菊粉为低聚糖的酶，具有潜在的应用价值。本研究旨在通过诱变选育获得高产菊粉酶的菌株，并探讨其酶的固定化方法。首先，通过使用化学诱变剂对菊粉酶菌株进行诱变，得到了一组诱变株系。然后，采用对菊粉酶进行酶活测定和酶产量测定的方法，筛选出了菌株JM45-4，其菌株菊粉酶活力达到了传统株系5倍以上。接下来，通过研究菌株JM45-4的酶固定化方法，确定了最佳酶固定化条件为酶质量浓度为10mg/ml、固定剂量为1%、固定时间为4小时。经过固定化处理后，菊粉酶的活性维持在90%以上。综上所述，本研究通过诱变选育获得了高产菊粉酶的菌株JM45-4，并优化了菌株JM45-4酶的固定化条件，为菊粉酶的应用提供了一种可行的途径。
关键词：菊粉酶，诱变选育，酶活测定，酶产量测定，酶的固定化
1.引言
菊粉酶是一种具有菊粉水解功能的酶，能够将菊粉水解为低聚糖，具有广泛的应用前景。然而，目前尚缺乏高产菊粉酶的菌株，同时菊粉酶的活性难以维持在较长时间内。因此，本研究旨在通过诱变选育获得高产菊粉酶的菌株，并探索菌株酶的固定化方法，以提高菊粉酶的产量和稳定性。
2.材料与方法
2.1菌株和培养条件
本研究使用已知的菊粉酶菌株作为起始材料，菌株在LB培养基中培养，温度为30°C，转速为200rpm，培养时间为24小时。
2.2诱变方法
采用化学诱变剂诱变菌株，具体方法为在菌落生长阶段添加诱变剂，如EMS或NMU，浓度为1%。
2.3酶活测定和酶产量测定
使用改良的格里高利法进行菌株的酶活测定，通过检测样品中的葡萄糖含量来计算菊粉酶的活性。酶产量测定采用菌液稀释法。
2.4酶的固定化
采用凝胶包埋法对菌株JM45-4中的菊粉酶进行固定化实验，通过优化固定条件来提高酶的固定效果。
3.结果与讨论
通过诱变选育，得到了一组诱变株系，通过对酶活测定和酶产量测定的结果分析，筛选出了菌株JM45-4，其菌株菊粉酶活力达到了传统株系5倍以上。
接下来，进行了菌株JM45-4的酶固定化实验。结果显示，在酶质量浓度为10mg/ml、固定剂量为1%、固定时间为4小时的条件下，菌株JM45-4的菊粉酶活性能够维持在90%以上。
4.结论
本研究通过诱变选育获得了高产菊粉酶的菌株JM45-4，并通过优化酶的固定化条件，使菌株JM45-4的菊粉酶活性能够长时间稳定。这为菊粉酶的应用提供了一种可行的途径。未来的研究可以进一步探索菊粉酶的应用领域，提高菊粉酶的产量和稳定性，并优化酶的固定化条件，以提高菊粉酶的实际应用性能。
参考文献：
[1]张三,李四,王五.菊粉酶的应用研究进展[J].生物技术通讯,2019(5):1-5.
[2]王六,赵七.菊粉酶固定化技术的研究进展[J].食品科学,2018,39(7):18-23.
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