色谱定性定量分析方法ppt课件.ppt

ChinaPharmaceuticalUniversity色谱分析方法验证一、色谱定性分析方法
分离对象较广例：盐酸乙哌立松片主要降解产物的定性鉴别鉴定要点：
1、利用LC-UV选择最佳LC分离条件，并确定主峰与降解产物的峰位；2、选择合适的离子源，利用LC-MS获得杂质的准分子离子峰。3.获得降解产物准分子离子峰的裂解信息。

方式一：在APCI条件下采用较高的CID电压或二级质谱裂解m/z175.3，获得碎片信息；

方式二：在GC-MS(EI)质谱获得分子离子峰及其裂解途径；4、利用原药的质谱裂解途径确定降解产物的可能结构；

APCI联用技术定性鉴定规律3、根据化合物结构，选用合适的光谱技术鉴定；

4、依据光谱信息进行结构鉴定：

根据质谱提供的分子量和分子碎片信息，结合原药的光谱信息初步推断未知物结构；

三、色谱定量分析方法三、不同检测器的色谱信号与物质浓度关系

FID、ECD、UV检测器的响应（峰面积）与样品的浓度呈线性关系；

ELSD响应的自然对数与样品的浓度或质量呈线性关系；

质谱（MS-ESI）检测器高浓度时的响应与样品的质量可能呈二次或更复杂的方式。
四、色谱分析方法验证药品质量标准分析方法验证
药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则
药物稳定性试验指导原则
缓释、控释制剂指导原则
①专属性（specificity）:

意义：指有其他成分可能存在情况下，采用的方法能准确测定出被测物的特性。

内容：药物制剂含量测定时的专属性考察内容：
A、杂质中间体与主成份的分离情况；
B、破坏性试验产生的降解产物与主成份的分离情况：酸、碱、热、氧化、光破坏
C、辅料是否干扰测定。②准确度（accuracy）：

意义：测量值与真实值接近的程度。

药物制剂的含量测定以回收率表示。

内容：即通过在空白基质中加入已知量不同浓度的对照品，比较测定值和加入值确定。
一般在期望浓度的80%、100%、120%三个水平量，各测定三次，回收率均值在98-102%。

③线性范围（linearityrange）：

意义：待测物浓度与响应值成线性关系的浓度范围；

内容：用不同浓度对照品溶液分析测定（至少5种），以峰面积与浓度进行线性回归。

制剂分析时方法要求r不小于0.999；生物样品分析要求r不小于0.99，与准确度的要求有关系。

注意：与定量方法中标准曲线法的异同。
④精密度（precision）：

意义：同一样品多次测量值之间相互接近的程度。

内容：
重复性:同一实验室,同一人多次测定的精密度
中间精密度:同一实验室，不同人，不同仪器测定的精密度
重现性:不同实验室，不同人测定的精密度

制剂分析时精密度RSD应不小于2%。

⑤检测限和定量限（LODandLOQ）：

意义：LOD是能检测到的最低量，S:N=3:1。
LOQ是能定量测定的最低量，S:N=10:1。
内容：
生物样品分析时定量下限即为标准曲线最低浓度点，定量上限即位标准曲线最高浓度点。⑥稳定性（stability）：

意义：考察分析样品与试剂在一定时间内稳定性。
内容：
根据样品与试剂测定时实际可能所处的环境进行考察。

⑦耐用性（robustness）：

意义：考察测定条件发生小变动时测定结果的变化。

内容：
流动相的组成和pH、商品柱的品牌尺寸、柱温等
⑧系统适用性（systemsuitabilitytest）：

意义：保证分析系统适用于定量分析。

内容：
条件优化时考察，包括理论塔板数、分离度、拖尾因子，考察进样精密度。