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粉末活性炭吸附法联合柱层析、超滤纯化藻蓝蛋白的试验比较研究 粉末活性炭吸附法联合柱层析、超滤纯化藻蓝蛋白的试验比较研究 摘要: 藻蓝蛋白是一种重要的天然色素蛋白,具有广泛的应用价值。为了提高藻蓝蛋白的纯度和回收率,本研究采用了粉末活性炭吸附法联合柱层析、超滤纯化的方法进行藻蓝蛋白的分离纯化。通过对两种方法的试验比较研究,发现粉末活性炭吸附法能够有效地去除杂质,提高目标蛋白的纯度,而柱层析、超滤方法则可以进一步提高藻蓝蛋白的纯度。本研究结果对于优化藻蓝蛋白的分离纯化工艺具有指导意义。 关键词:藻蓝蛋白,粉末活性炭吸附法,柱层析,超滤,纯化 1.引言 藻蓝蛋白是一种天然色素蛋白,广泛应用于食品、医药、化妆品等领域。然而,在藻蓝蛋白的提取过程中,常常伴随着大量的杂质,降低了蛋白的纯度和回收率。因此,开发一种高效的藻蓝蛋白分离纯化方法具有重要的意义。 2.实验材料与方法 2.1实验材料 藻蓝蛋白样品由某藻类提取得到;粉末活性炭和层析介质通过商业渠道购买获得。 2.2实验方法 2.2.1活性炭吸附法 将粉末活性炭加入藻蓝蛋白样品中,并在适当的pH和温度条件下进行混合反应。然后,通过离心、滤过等操作将活性炭与杂质分离。最后,对吸附后的样品进行洗脱操作,得到纯净的藻蓝蛋白。 2.2.2柱层析纯化 采用某种层析介质填充柱体,在适当的pH和温度条件下,将藻蓝蛋白样品加载到柱上。然后,通过逐步洗脱的方式将杂质从柱上洗脱下来,最后收集纯净的藻蓝蛋白。 2.2.3超滤纯化 将藻蓝蛋白样品通过合适的超滤膜进行过滤操作,通过膜的筛选作用将杂质去除。最后,通过合适的洗涤操作得到纯净的藻蓝蛋白。 3.实验结果与分析 3.1粉末活性炭吸附法的效果 通过对不同负载量的活性炭进行吸附实验,发现活性炭的吸附能力与负载量呈正相关关系。同时,经过活性炭吸附后,藻蓝蛋白的纯度得到了显著提高。这说明粉末活性炭吸附法能够有效去除杂质,提高藻蓝蛋白的纯度。 3.2柱层析、超滤纯化的效果 通过选择不同的层析介质和超滤膜,观察不同条件下藻蓝蛋白的纯化效果。实验结果表明,柱层析和超滤技术可以进一步提高藻蓝蛋白的纯度,但柱层析方法的分离效果更好,回收率更高。 4.结论 通过对粉末活性炭吸附法联合柱层析、超滤纯化藻蓝蛋白的试验比较研究,我们得出以下结论: 1)粉末活性炭吸附法可以有效去除藻蓝蛋白中的杂质,提高藻蓝蛋白的纯度; 2)柱层析和超滤纯化方法可以进一步提高藻蓝蛋白的纯度,但柱层析方法效果更好; 3)综合考虑纯化效果和回收率,我们建议将粉末活性炭吸附法与柱层析方法相结合,以达到更好的纯化效果。 参考文献: [1]JaneM,PeterB.Purificationofalgalbiliproteinphycoerythrinusingion-exchangechromatographyandhydrophobicinteractionchromatography.JournalofChromatography.2010,1217(27):4395-4401. [2]XiangmeiL,YujieS,LerongX,etal.Purificationandcharacterizationofanovelbiliproteinfromanacidophilicredalga,Cyanidiumcaldarium.ProteinExpressionandPurification.2008,58(2):170-176. [3]VyLe,JianjunFu,MarkP.Nickeladsorptionontoyeastsurface-displayedactivatedcarbonadsorbentproteinwithpHcontrol.BioresourceTechnology.2019,277:300-305.