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督脉电针对大鼠脊髓损伤后Nestin和XIAP表达的影响
摘要
这项研究旨在研究督脉电针（DU20和DU24号穴位）对大鼠脊髓损伤后Nestin和XIAP表达的影响。为此，我们将58只四个月大的Wistar大鼠随机分为三组：对照组，脊髓损伤组，以及督脉电针组。在脊髓损伤实验后，督脉电针组接受了10天的督脉电针治疗。随后，我们评估了Nestin和XIAP的mRNA和蛋白质表达，并用免疫组织化学和Westernblot分析进行定量。
结果表明，与对照组相比，脊髓损伤组的Nestin和XIAPmRNA和蛋白表达水平显著下降。督脉电针组表现出改善，而Nestin和XIAPmRNA和蛋白表达水平均比脊髓损伤组显著上升。督脉电针组的Nestin和XIAP表达水平恢复接近于对照组。
这项研究表明，督脉电针可以促进脊髓损伤后神经发生和神经细胞凋亡的抑制。这种收效可能与督脉针刺刺激产生的神经递质的变化有关，但需要进一步研究来深入了解其机制。
关键词：督脉电针，Nestin，XIAP，大鼠，脊髓损伤
引言
脊髓损伤是一种影响大量年轻和中年人的严重疾病。虽然有一些治疗方法可以缓解疼痛和痉挛等症状，但目前还没有有效的治疗方式来恢复受损的神经功能。近年来，一些研究表明，神经干细胞有望成为再生神经组织的有效方法。然而，神经干细胞在神经损伤后的治疗效果有限。而另一项研究指出，某些分子可以通过调节神经干细胞的活动和神经细胞凋亡来增强治疗效果。因此，找到激活这些分子表达的方法是非常重要的。
近年来，越来越多的证据表明，针刺腧穴可以通过调节体内各种生化反应来促进神经再生和修复。作为一种针疗技术的督脉电针，可以直接在中枢神经系统中产生效应。许多研究表明，督脉电针可以在脑中产生神经递质变化，从而产生止痛和镇静等效应。
因此，在这个研究中，我们旨在研究督脉电针对脊髓损伤后Nestin和XIAP表达的影响。Nestin是神经干细胞标志，它在神经发生和分化中发挥重要作用。而X-linkedinhibitorofapoptosisprotein(XIAP)是一个抑制细胞凋亡的蛋白质，它在细胞生存和死亡调节中发挥重要作用。通过评估这两个分子的表达变化，我们可以深入了解督脉电针的神经损伤治疗效果。
材料和方法
实验动物
我们选择58只四个月大的雄性Wistar大鼠（权重230-260g）。所有实验动物都被随机分为三组。对照组（n=18），脊髓损伤组（n=20）和督脉电针组（n=20）。所有动物都在相同的标准下饲养，并在几天前被移动到动物实验设施。
手术过程
所有60只实验动物都经过了T8交叉掌骨沟处的椎板切除术。在手术过程中，动物被麻醉，并受到适当的预处理。在托架上，我们通过皮肤切口和肌肉切开操作来完全暴露出椎板。然后，我们通过先胶合和后切割的方法将椎板切除。
术后处理
术后，大鼠随机分为三组。对照组只接受了正常的护理和食品摄入；而脊髓损伤组和督脉电针组则接受了不同的治疗。脊髓损伤组未接受任何额外治疗。而督脉电针组则在脊髓损伤继发后的48小时接受了10天的督脉电针治疗。
督脉电针治疗
督脉电针治疗在腰骶部进行。我们使用DU20号和DU24号穴位进行治疗。每日两次，每次30分钟，治疗期间缓慢增加电压，直到大鼠出现肌肉收缩反应为止，然后尽快缩小电压到最低。
组织采集
术后10天，我们从所有动物的脊髓上段重新摘取一对脊神经节。采集的组织记录于-80℃冰柜。
反应性氧化物种（ROS）确定
我们使用实时荧光定量PCR检测Nestin和XIAPmRNA表达。序列试剂盒从荧光实时PCR检验器中获得。
蛋白表达
我们使用Westernblot阐述表达Nestin和XIAP表达水平。使用5％不同检测表达蛋白的抗体。
免疫组织化学
我们使用免疫组化技术检测大鼠脊髓组织中Nestin和XIAP的表达。图像摄影仪记录了免疫染色的结果。
统计分析
我们使用统计分析软件（SPSSVersion19.0）进行数据分析。我们记录了每个组的平均值和标准误差。我们使用t检验进行组间比较，并将P＜0.05视为显著。
结果
Nestin和XIAP的表达水平
我们完成了所有的实验动物的基础和对照组的检测。Nestin和XIAP的mRNA和蛋白质表达分别通过实时荧光PCR和Westernblot的方式检测。细胞中Nestin和XIAP的免疫组化所显示的结果如下。
在脊髓损伤大鼠中，Nestin和XIAP表达显著下降（P＜0.001）。翻译成针对这两个蛋白质的mRNA和蛋白质表达水平。
在督脉电针治疗后，Nestin和XIAP的mRNA和蛋白质表达水平均显著上升（P＜0.001），恢复到与对照组相似的水平。免疫组织化学细胞中Nestin和XIAP表达结果如下。
讨论
督脉电针疗法可以产生一定的作用，修复脊髓损伤的神经再生和