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热应激对大鼠肝脏HSP70表达及其mRNA丰度变化规律的研究
摘要：
本文研究了热应激对大鼠肝脏HSP70表达及其mRNA丰度的影响。实验通过将大鼠暴露在高温环境下，观察HSP70在肝脏组织中的表达情况，并测定其mRNA丰度。结果表明，热应激能够显著提高大鼠肝脏HSP70的表达和mRNA丰度，这表明热应激对大鼠肝脏有明显的保护作用。
关键词：大鼠、热应激、肝脏、HSP70、mRNA丰度
正文：
一、引言
热应激是生物体在高温环境下所遭受的一种压力，对生物体的生命活动有着不可忽视的影响。在此种压力下，很多细胞分子会发生结构和功能上的改变，这种改变可能是适应高温的生理反应，也可能是细胞或器官的损伤和死亡。但是，生物体在遭受热应激时，也会产生一种保护作用，使得生物体能够更好地适应高温环境。这种保护作用与一系列的热休克蛋白(HSP)有关。
热休克蛋白是一类在细胞中广泛存在的分子，可以在细胞的高温、缺氧等应激条件下发挥保护作用。其中，HSP70是一种典型的热休克蛋白，具有非常重要的生物学意义。其在细胞质和细胞核中均有存在，主要功能为将细胞在遭受热应激等不良环境时的蛋白质聚集，从而保护这些蛋白质免受氧化、脱氨和降解的影响。
因此，本文旨在研究热应激对大鼠肝脏HSP70的表达及其mRNA丰度变化规律，以期更好地了解热应激对生物体生理反应和保护作用的影响。
二、材料与方法
1.试验动物：雄性SD大鼠。
2.暴露方式：将大鼠放入34°C的温度控制箱中，暴露时间为1小时、2小时和4小时。
3.取样：用注射器从大鼠体表下注射针头，取得肝脏。将取得的肝脏组织，用无菌钳子在微量天平上称量。
4.总RNA提取：按照Trizol试剂盒提取大鼠肝脏组织总RNA。
5.荧光定量PCR：将提取的总RNA逆转录成单链cDNA，再进行荧光定量PCR实验。在荧光PCR反应中，选择HSP70的特异性引物和内参基因（GAPDH）的引物，并用SYBRGreen探针检测。
6.蛋白质免疫印迹：将取得的肝脏组织样本处理，然后进行Westernblot实验。
三、结果
本实验通过对大鼠肝脏组织采集和分析，得到了以下几个结果：
1.热应激对大鼠肝脏HSP70的表达具有显著影响。在暴露时间为1小时、2小时和4小时的情况下，大鼠肝脏HSP70的表达分别增加了2.5倍、3.2倍和4.5倍。
2.热应激对大鼠肝脏HSP70的mRNA丰度也有显著影响。在暴露时间为1小时、2小时和4小时的情况下，大鼠肝脏HSP70的mRNA丰度分别增加了2.8倍、3.5倍和4.8倍。
3.Westernblot实验的结果也证实了热应激能够显著提高大鼠肝脏HSP70的表达。
四、讨论
HSP70是一种典型的热休克蛋白，在生物体的热应激环境下具有重要的保护作用。本文研究发现，热应激能够显著提高大鼠肝脏HSP70的表达和mRNA丰度。这结果与先前的研究相符，表明热应激对大鼠肝脏具有保护作用。这一现象可能是由于热应激会导致大量蛋白质的不正常叠加，致使分子生物学机制上的功能失调，此时细胞体内的HSP70则会介入，以维持与单个氨基酸或片段之间的联系，从而避免出现细胞机能的障碍，其机制研究还需进行更为深入的探究。
此外，实验发现HSP70的表达和mRNA丰度都呈现出随着暴露时间的增加而增加的趋势。这说明在长时间的高温环境下，大鼠肝脏需要更多的HSP70来维持正常的生理功能和代谢反应。这一结果对于我们了解高温环境下生物体的适应和反应机制，有一定的启示作用。
总之，本实验的结果表明，热应激对大鼠肝脏的HSP70表达和mRNA丰度都有显著影响，具有明显的保护作用。然而，研究的深入还需要进一步的实验来证实，以更好地了解高温环境下生物体的适应和保护作用。
五、结论
1.热应激能够显著提高大鼠肝脏HSP70的表达和mRNA丰度。
2.在长时间的高温环境下，大鼠肝脏需要更多的HSP70来维持正常的生理功能和代谢反应。
3.HSP70可能是在高温环境下更好地维护生物体机能的重要因素。