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猪苓多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能调节的研究
摘要：
猪苓多糖作为一种具有免疫调节活性的天然产物，已被广泛应用于中医药领域。本研究旨在探讨猪苓多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响。通过体外培养巨噬细胞，探究猪苓多糖对其吞噬活性、NO产生、IL-1β和TNF-α等炎症因子的表达等指标的影响。结果表明，猪苓多糖可以显著提高小鼠巨噬细胞的吞噬活性，且增加其NO的产生和IL-1β和TNF-α等炎症因子的表达水平。此外，猪苓多糖还可以抑制小鼠巨噬细胞对LPS的反应性，从而达到免疫调节的作用。综上所述，猪苓多糖对小鼠巨噬细胞免疫功能具有显著的调节作用，可作为潜在的免疫调节剂应用于临床实践中。
关键词：猪苓多糖；巨噬细胞；免疫调节；炎症因子
Abstract:
Asanaturalproductwithimmuneregulationactivity,PoriacocospolysaccharidehasbeenwidelyusedintraditionalChinesemedicinefield.Thisstudyaimedtoinvestigateitseffectontheimmunefunctionofmurineperitonealmacrophages.Invitro,thePoriacocospolysaccharidewasappliedtoculturemurinemacrophages,andthephagocyticactivity,NOproduction,expressionofIL-1βandTNF-αinflammatoryfactorsandotherindicatorswereexamined.TheresultsshowedthatPoriacocospolysaccharidecouldsignificantlyimprovethephagocytoticactivityofmurinemacrophages,andincreasetheproductionofNOandtheexpressionlevelsofIL-1βandTNF-αinflammatoryfactors.Moreover,PoriacocospolysaccharidecouldinhibittheresponsivenessofmurinemacrophagestoLPS,thusachievingitsimmunemodulatoryeffect.Inconclusion,Poriacocospolysaccharidehasasignificantregulatoryeffectontheimmunefunctionofmurinemacrophages,andcanbeappliedasapotentialimmunomodulatoryagentinclinicalpractice.
Keywords:Poriacocospolysaccharide;macrophage;immuneregulation;inflammatoryfactors
正文：
Ⅰ.引言
研究表明，巨噬细胞是机体免疫系统的重要成分之一，其细胞发育、生长和功能能被其所暴露的环境和局部刺激所影响。炎症反应是一种机体自我保护的反应，但过度的炎症反应可能会导致很多疾病的发生。因此，调节巨噬细胞免疫功能是研究有效免疫调节剂的重要一步。
猪苓多糖是一种从猪苓中分离出的水溶性多糖，已证明具有多种生物活性效应，包括免疫增强、抗氧化、抗肿瘤等作用。由于其天然、有效、安全等特点，猪苓多糖被认为是一种有潜力的免疫调节剂。然而，其对巨噬细胞免疫功能的调节作用尚不清楚。因此，本研究旨在探讨猪苓多糖对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响。
Ⅱ.材料与方法
1.材料
小鼠
LPS
MTT、NO试剂盒
ELISA试剂盒
2.方法
(1)巨噬细胞培养
从小鼠腹腔中取出巨噬细胞，用L-DMEM培养基（含10%FBS）在37℃、5%CO2的规定条件下孵育。
(2)细胞活性检测
用MTT实验检测巨噬细胞的细胞活性。
(3)细胞吞噬活性检测
采用荧光素化巴氏杆菌（FITC-EB）进行巨噬细胞的吞噬活性实验。
(4)NO产生量检测
使用NO试剂盒检测巨噬细胞Karrassay.
(5)炎症因子水平检测
采用ELISA法检测IL-1β和TNF-α等炎症因子的水平。。
(6)处理巨噬细胞
猪苓多糖和LPS分别用于处理巨噬细胞，并观测其效应。
①处理巨噬细胞前，产生有新鲜的巨噬细胞。
②把巨噬细胞平均分配到6孔板（1×105个/ml）内，加入L-DMEM培养基含10%FBS和LPS，并分别加入猪苓多糖不同浓度的溶液。
③滴加荧光素化巴氏杆菌，观察吞噬活性；
④检测的巨噬细胞Karrassay
⑤酶联免疫吸