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早期应激对成年大鼠伏隔核多巴胺受体2基因表达的影响
摘要：
应激会对脑神经系统产生影响，进而影响到物种的行为和生理反应。在本研究中，我们探讨了早期应激对成年大鼠伏隔核多巴胺受体2基因表达的影响。通过实验结果，我们发现了早期应激对大鼠DN-2基因表达的影响，并探讨了其可能的神经生理机制。研究结果表明，早期应激对DN-2基因表达可能与垂体-肾上腺皮质系统等神经递质、荷尔蒙和信号通路有关。
引言：
应激是一种普遍存在于自然界中的现象，它是指环境和心理变化所产生的应physiologic反应。应激这一概念主要来源于人类及其相关研究领域，但研究结果表明，不同的生物物种对应激反应的表现形式和机制略有不同。应激会导致人和动物的生理、行为以及心理上的改变，背后的机制涉及多个脑区、神经系统和信号通路。针对应激的研究，成为探究物种结构、行为和生理机制的常用方法。
在哺乳动物中，多巴胺（DA）是一种调节神经递质，对行为、情感和认知等方面的功能发挥重要作用。DA受体在脑内多个部位表达，其中被广泛研究的D1、D2受体分别有独特的生理和药理特性。DN-2基因编码的受体可分布在伏隔核等部位，大鼠DN-2基因表达的变化可能与应激有关。因此，在本研究中我们将重点探究早期应激对DN-2基因表达的影响和其相关的神经生理机制。
材料与方法：
1.动物实验：我们选取6周龄、体重200克左右的雄性Sprague-Dawley鼠，进行以母体行为分离（maternalseparation,MS）为基础的早期应激操作。具体操作包括将新生鼠在出生后随后3-12小时内分离出来，随后每天在早上8:00至10:00间在不同的母鼠笼中放置3个小时后将其送回原笼。至目标金钩后，由20%氯醛麻醉后死亡，于大脑中央切片后提取伏隔核进行基因表达（qRT-PCR）分析。
2.qRT-PCR:我们使用Trizol试剂提取大鼠伏隔核中的RNA，采用SybrGreenI荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）技术测定DN-2基因表达量。反应条件为：94°C静置2min；94°C，30秒；58.2°C,30秒；72°C,30秒；40个循环；PCR产物分别进行质谱测序，鉴定品种，比对BLAST库，确保获得有价值的实验结果。
结果：
通过统计分析，我们发现，相较于对照组，母鼠分离组表现出了显著的DN-2基因表达下调现象（P＜0.05）。（表1）。
表1早期应激对成年大鼠伏隔核多巴胺受体2基因表达的影响
组别
DN-2（平均值±标准差）
p值
对照组
1.00±0.15
-
母鼠行为分离组
0.54±0.10
＜0.05
我们进一步对母鼠行为分离组和对照组鼠的解剖结构做了对比。我们发现母鼠行为分离组鼠的伏隔核大小、神经元数目、细胞密度等参数均较对照组鼠低（图1）。
图1伏隔核神经元数量和细胞密度比对
讨论：
我们的实验结果表明，在早期应激的情况下，成年大鼠伏隔核中多巴胺受体2（DN-2）的表达水平会出现显著下调，这一结果与之前的研究结果相似。早期的应激会引起神经元的凋亡和功能变化，导致神经系统的重大创伤。此次实验结果还证实了其他研究结果，早期哺乳对大鼠神经发育和成熟的影响，情绪、认知和行为的调控等都与母鼠抚育有关。
早期应激对DN-2的影响可能涉及多个神经和荷尔蒙递质，如垂体-肾上腺皮质系统，视为应激反应的核心组成部分。此外，早期应激对脑区、神经系统和信号通路的改变也可能是对DN-2表达的负面影响的原因。因此，未来的研究可以进一步探讨这些生物化学过程的互动。
结论：
本研究结果表明早期应激对成年大鼠伏隔核中DN-2基因表达的含量有明显影响。这一结果揭示了早期应激的不良影响，同时也提醒我们要重视早期应激带来的灾害。未来的研究可以进一步深入探究哺乳母体行为和应激的关系以及针对不同应激状态下的神经生理机制的研究。这些研究成果将为未来通过治疗和预防措施改善人和动物的应激状态提供有用的理论支持。