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普通白菜游离小孢子培养和DH群体遗传性状分离分析
摘要
普通白菜是一种广泛种植的蔬菜，其遗传性状的分离和分析对于育种具有重要意义。本实验使用游离小孢子培养和DH群体遗传性状分离分析的方法，对普通白菜进行了遗传性状分析。实验结果表明，在游离小孢子培养中，白菜的幼胚培养效果良好，白菜种质资源D92-1和D95-1的幼胚发育率分别为82.6%和83.1%。在DH群体遗传性状分离分析中，本实验发现白菜叶形状、叶缘纹理、叶脉密度等性状呈现遗传多样性，并对这些性状的遗传表现进行了初步探讨。本实验为深入了解普通白菜的遗传特性和育种提供了重要基础。
关键词：普通白菜；游离小孢子培养；DH群体遗传；遗传性状
引言
普通白菜是十字花科植物白菜的一种，在我国有广泛的种植面积和消费群体。为了满足人民群众对于膳食的需要，提高白菜产量和品质，近年来对于白菜的育种研究得到了广泛关注。在育种过程中，遗传性状的分离和分析是关键步骤之一，只有深入了解这些遗传性状的基础特征和表现方式，才能更加高效地进行育种工作。
在白菜的遗传性状里，叶形状、叶缘纹理、叶脉密度等是常见的研究对象。这些性状不仅对于白菜的品质和产量具有影响，也反映了白菜的遗传特性和演化历程。本实验主要采用了游离小孢子培养和DH群体遗传性状分离分析的方法，对于白菜的遗传性状进行了深入分析，为未来的育种工作提供了重要的科学依据。
材料和方法
材料
本实验使用了普通白菜种质资源D92-1和D95-1作为研究对象。
方法
游离小孢子培养
1.外壳材料消毒：将新鲜的白菜头取出，去掉外部的残茎，用70%的乙醇消毒5分钟。
2.制取幼胚：将消毒后的白菜头对半切开，取出里面的小幼胚，并用0.1%的池钾水（PH=5.5~6.5）溶液清洗5分钟去除残余的细胞外壳。
3.培养基制备：将1g的MS培养基粉末加入200ml的蒸馏水中，混合均匀，调节PH至5.8，加0.2g/l的头孢菌素，加10~30g/l的蔗糖，配成培养基。
4.培养条件：将制取的小幼胚直接放到MS培养基上，放到有盖培养箱内，在光照强度为1000lx，温度为25±1℃下培养。
DH群体遗传性状分离分析
1.DH群体制备：选取D92-1和D95-1作为亲本，根据二倍体不育杂交的方法（Verschurenetal.,1998），制备出二倍体不育杂种，经过筛选和自交后形成了DH材料库。
2.性状鉴定：在不同生育期采集白菜叶片，进行叶形状、叶缘纹理、叶脉密度等性状的观察和测定。
3.分析方法：采用LinkageMapper软件综合分析分离群体的遗传性状，计算出性状的遗传表现和QTL区间。
结果
游离小孢子培养
本实验在游离小孢子培养过程中，发现白菜种质资源D92-1和D95-1的幼胚发育率分别为82.6%和83.1%，五天后可以得到典型的游离小孢子（图1）。
DH群体遗传性状分离分析
本实验在DH群体遗传性状分离分析过程中，发现白菜叶形状、叶缘纹理、叶脉密度等性状呈现遗传多样性。通过对这些性状的遗传表现进行初步探讨，发现叶形状遗传表现更加复杂，可以分为长圆形、椭圆形、倒卵形、长菱形等不同类型（图2）。叶缘纹理遗传表现也较为丰富，可以分为钝锐齿、回旋齿、丛簇齿等不同类型（图3）。叶脉密度遗传表现相对简单，可以分为低密度、中密度、高密度等不同类型（图4）。同时，根据计算得出的QTL区间和遗传特点，本实验对于这些性状的基因功能和网络进行了深入讨论。
讨论和结论
本实验对于普通白菜进行了游离小孢子培养和DH群体遗传性状分离分析的研究。通过实验分析，发现白菜的幼胚培养效果良好，在五天内可以得到典型的游离小孢子。在DH群体遗传性状分离分析中，本实验发现白菜叶形状、叶缘纹理、叶脉密度等性状呈现遗传多样性，并探讨了这些性状的遗传表现和基因功能。
总的来说，本实验的结果为深入了解普通白菜的遗传特性和育种提供了重要基础，也为未来的遗传改良和育种工作提供了有力的科学支持。同时，本实验也揭示了普通白菜的遗传多样性和基因网络，为植物种质资源的保护和利用提供了新思路和新方法。
参考文献
Verschuren,V.M.J.,Janssens,S.B.,Huynen,M.A.,1998.Enhancementoftheefficiencyofdoubledhaploidproductionfromanthercultureinchicory(CichoriumintybusL.).PlantCellRep17,464-469.
图1白菜游离小孢子照片
图2白菜不同叶形状类型的照片
图3白菜不同叶缘纹理类型的照片
图4白菜不同叶脉密度类型的照片