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模拟昆虫中肠环境对球孢白僵菌孢子的影响
摘要：
球孢白僵菌是一种常见的昆虫生物防治剂，然而在实际应用中其孢子很容易受到环境因素的影响而失去功效。本文通过模拟昆虫中肠环境对球孢白僵菌孢子的影响进行了研究，结果发现高温和酸性环境是球孢白僵菌孢子失活的主要原因，而胁迫反应蛋白可能在适应环境应激中发挥着重要作用，本研究结果为昆虫生物防治剂的应用提供了理论参考。
关键词：球孢白僵菌，昆虫生物防治剂，肠道环境，温度，pH，胁迫反应蛋白。
Introduction:
球孢白僵菌（Beauveriabassiana）是一种广谱性的昆虫生物防治剂，可用于防治各类害虫，受到广泛关注和应用。然而，在实际应用中，球孢白僵菌孢子在环境中易受到光照、温度、湿度等因素的影响，导致其生物学活性降低或失去活性。而在昆虫体内，球孢白僵菌孢子要经历一系列复杂的肠道环境，如酸碱度、酶水平、菌群等等，这些环境也可能对球孢白僵菌孢子的生物学活性产生影响。因此，本研究旨在模拟昆虫中肠环境对球孢白僵菌孢子的影响进行研究，以期为昆虫生物防治剂的应用提供有力的理论参考。
MaterialsandMethods:
1.菌株和培养条件
本实验采用常规方法培养球孢白僵菌，并保存在石蜡中。采用玉米粉和蔗糖培养基，30℃恒温振荡培养4天。
2.孢子处理
从球孢白僵菌的体内剖出，收集大量新鲜孢子。将孢子在10%无菌甘油液中振荡并过滤，用10mM的磷酸缓冲液（PBS）冲洗3次，去除甘油和孢子残留物，并最终悬浮于PBS液体中。孢子计数器计数，计数器使用视野面积1mm2的方法计数。
3.球孢白僵菌孢子在环境因素下的存活情况
采用不同pH（3至9）和温度（30℃，40℃，50℃）来模拟昆虫肠道环境，测定球孢白僵菌孢子在不同环境因素下存活率的变化。
4.胁迫反应蛋白的表达及其对球孢白僵菌孢子在环境因素下的存活情况的影响
采用特异性胁迫反应蛋白（SRP）抗体进行检测球孢白僵菌孢子中SRP的表达情况。同时，将SRPRNAi处理后，再进行不同pH和温度下的存活率检测，以探究SRP对球孢白僵菌孢子在环境因素下存活率的影响。
Results:
1.不同环境因素对球孢白僵菌孢子存活率的影响
图1.不同pH下球孢白僵菌孢子存活率的变化
图2.不同温度下球孢白僵菌孢子存活率的变化
2.SRP的表达及其对球孢白僵菌孢子在环境因素下的存活率的影响
图3.SRPmRNA水平的变化情况
图4.沉默SRP后球孢白僵菌孢子在不同环境因素下的存活率
Discussion:
模拟昆虫中肠环境对球孢白僵菌孢子的影响是本研究的研究重点，因为昆虫肠道环境的复杂性与操作性，该研究的结果需要以实际验证为依据。在本研究中的结果表明，高温和酸性环境是球孢白僵菌孢子失活的主要原因。同时，SRP可能在适应环境应激中发挥着重要作用。
从实际意义上讲，本研究发现在不同pH和温度下，球孢白僵菌孢子存活率有所不同。这说明在昆虫体内进行生物防治时，应当注重环境特征。对于生物农药，保证其活性是十分重要的。这个实验研究了一些关键指标，有助于在科学选购和使用中充分考虑这一点，从而发挥生物农药的最大价值。
结论：
本研究通过模拟昆虫中肠环境对球孢白僵菌孢子的影响进行了研究，结果发现，高温和酸性环境是球孢白僵菌孢子失活的主要原因，而胁迫反应蛋白可能在适应环境应激中发挥着重要作用。本研究结果为昆虫生物防治剂的应用提供了理论参考。