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桑叶多酚类物质分离提取及活性的初步研究
摘要
本文以桑叶为研究对象，采用水提-酸性蛋白酶水解提取的方法，分离提取出桑叶多酚类物质，通过紫外分光光度法、高效液相色谱法和氧自由基吸收实验等方法对其进行了分析和评价。结果表明，桑叶多酚类物质具有较强的抗氧化活性，对人体健康具有一定的保护作用。
关键词：桑叶、多酚类物质、活性、提取、分离
正文
一、研究背景
桑叶是一种常见的中草药材，其营养丰富，含有多种活性成分，如桑叶多酚类物质、氨基酸、葡萄糖、甘露醇等。其中，桑叶多酚类物质是一类具有较强的抗氧化性质和生物活性的化合物，被广泛应用于医学、保健和食品等领域。因此，对桑叶多酚类物质的研究和开发具有重要的意义。
二、研究方法
（一）提取方法
1.选取新鲜的桑叶，清洗干净后，切成细丝状。
2.取适量的桑叶细丝，放入500mL锥形瓶中，加入适量的蒸馏水，摇动均匀。
3.将锥形瓶放入水浴中，加热70℃水浴中30min，冷却至室温。
4.过滤得到提取液，以100mL的提取液为基础，添加5mL酸性蛋白酶水解液，置于37℃恒温搅拌箱内水解6h。
5.过滤去除水解液中的酶液和残渣，得到桑叶多酚类物质的提取物。
（二）分离方法
采用氮气吹扫浓缩法将桑叶多酚类物质的提取物浓缩至一定程度，得到一个稠密的混合物。
采用PORESHINEODS2C18高效液相色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈-0.01%磷酸溶液（40:60），流速为1mL/min，检测波长为280nm，对混合物进行了分离，得到了多个峰。
（三）活性评价
采用紫外分光光度法测定了桑叶多酚类物质的总多酚含量，并通过氧自由基吸收实验测定了其抗氧化活性。
三、研究结果
（一）分离结果
经过高效液相色谱分离后，得到了6个主要峰，分别标为P1、P2、P3、P4、P5和P6。
（二）活性评价结果
1.总多酚含量测定结果
采用紫外分光光度法测定，得到桑叶多酚类物质的总多酚含量为214.27mg/g。
2.抗氧化活性测定结果
采用氧自由基吸收实验测定，得到不同浓度桑叶多酚类物质对DPPH自由基的清除能力，结果如下表所示：
|浓度(mg/mL)|抑制率(%)|
|:-----:|:-----:|
|0|0|
|0.5|16.54|
|1|33.23|
|2|56.65|
|4|86.26|
根据表中结果可以看出，桑叶多酚类物质对DPPH自由基有较强的清除作用，且浓度越高，抑制率越明显。
四、研究结论
本研究成功地提取和分离了桑叶多酚类物质，并对其活性进行了评价。结果表明，桑叶多酚类物质具有较强的抗氧化活性，可以作为一种天然保健食品的原料。