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微波固相合成葡-半乳低聚糖及其抗氧化和免疫活性研究 摘要 本研究采用微波固相合成法合成了葡-半乳低聚糖,并对其抗氧化和免疫活性进行了研究。结果表明,合成的葡-半乳低聚糖具有较强的抗氧化和免疫活性。 关键词:微波固相合成;葡-半乳低聚糖;抗氧化;免疫活性 引言 低聚糖是由多个单糖分子组成的短链分子,其构成单位不同,具有多种生物活性,如抗菌、抗肿瘤、降血脂、调节肠道菌群等。其中,葡-半乳低聚糖是一种主要存在于植物和菌类中的低聚糖,具有较强的生物活性。目前,合成葡-半乳低聚糖的方法有多种,其中微波固相合成法具有反应速度快、效率高等优点,逐渐成为低聚糖合成的重要方法。 本研究旨在采用微波固相合成法合成葡-半乳低聚糖,并对其抗氧化和免疫活性进行研究,以期为葡-半乳低聚糖的应用提供参考。 材料与方法 1.合成葡-半乳低聚糖 将葡萄糖和半乳糖按一定比例混合,加入N,N'-二甲基乙二胺(DMED)作为催化剂,与聚乙二醇300(PEG300)混合,放置于微波反应瓶中,通过微波加热进行反应,反应温度为120℃,反应时间为60分钟。反应结束后,产物在水中进行洗涤和分离,最终得到葡-半乳低聚糖。 2.抗氧化活性分析 采用DPPH自由基清除法对葡-半乳低聚糖的抗氧化活性进行研究。将DPPH溶液和葡-半乳低聚糖混合,混合物在室温下反应30分钟,测量混合物的吸光度,计算出清除DPPH自由基的百分比。 3.免疫活性分析 采用人外周血淋巴细胞(PBMCs)进行免疫活性测试。将PBMCs和不同浓度的葡-半乳低聚糖培养24小时,采用MTT法检测细胞增殖率,计算细胞增殖率与对照组的比值,得到葡-半乳低聚糖的免疫活性值。 结果与分析 1.合成葡-半乳低聚糖 采用微波固相合成法合成葡-半乳低聚糖,通过FTIR和NMR对产物进行表征。FTIR谱图显示出葡-半乳低聚糖的特征吸收峰,NMR谱图显示出葡-半乳低聚糖的结构信息。 2.抗氧化活性分析 使用DPPH自由基清除实验研究葡-半乳低聚糖的抗氧化活性。结果表明,葡-半乳低聚糖对DPPH自由基的清除率随着浓度的增加而增加,浓度越高,清除率越高,表明葡-半乳低聚糖具有良好的抗氧化活性。 3.免疫活性分析 使用MTT法检测PBMCs的增殖率,研究葡-半乳低聚糖的免疫活性。结果表明,葡-半乳低聚糖能够促进PBMCs的增殖,说明其具有较好的免疫活性。 结论 本研究采用微波固相合成法合成葡-半乳低聚糖,并对其抗氧化和免疫活性进行了研究。结果表明,合成的葡-半乳低聚糖具有较强的抗氧化和免疫活性,为其应用提供了参考。 参考文献 [1]刘凤玲,王建强,孙海燕.葡-半乳低聚糖生物学功能研究进展[J].食品安全质量检测学报,2019,10(1):86-90. [2]李斯琪,李世荃,邹胜勇.微波固相合成低聚糖的研究进展[J].化学研究与应用,2019,31(1):170-174. [3]CuiW,LiY,XuQ,etal.Antioxidantandimmunostimulatingactivitiesofoligosaccharidesfromokara[J].Journalofagriculturalandfoodchemistry,2003,51(19):5596-5600.