小鼠脾源性内皮祖细胞培养及7.0T MR磁标记单细胞成像研究.docx

小鼠脾源性内皮祖细胞培养及7.0TMR磁标记单细胞成像研究
摘要
本文利用小鼠脾源性内皮祖细胞作为基础材料，采用培养和7.0TMR磁标记技术，研究单细胞成像。结果显示，成功培养出小鼠脾源性内皮祖细胞，并利用3个重复实验，证明其细胞形态、增殖能力、分泌能力均符合内皮祖细胞特点。通过将MSPIO和线性聚谷氨酸复合后，对内皮祖细胞进行磁标记，成功实现单细胞成像，并发现磁标记后的内皮祖细胞在MR和光显微镜下均呈现高信号。因此，我们得出结论：小鼠脾源性内皮祖细胞可以被成功培养和磁标记，且可以通过7.0TMR进行单细胞成像，这一技术为内皮祖细胞研究提供了新的方法。
关键词：脾源性内皮祖细胞，培养，磁标记，单细胞成像，7.0TMR
引言
内皮祖细胞是一类具有分泌介导调节血管生长的能力，有着多种细胞表面标志物特征的干细胞。由于其对细胞治疗具有重要意义，使得内皮祖细胞的研究在科研水平上得到了极大地发展，其研究方向也向机体内内皮细胞的更新、再生以及基因改型方向发展。
磁共振成像技术(MRI)因其对器官和组织结构的高清晰度成像和非侵入性等特点，成为医学高端成像领域的重要技术之一。近年来，MRI技术的应用领域不断拓展，特别是通过对细胞的MR成像，实现对个体化医学的进一步探索。本文旨在以小鼠脾源性内皮祖细胞为研究对象，探究其在MRI技术下的单细胞成像技术研究的可行性及相关特点。
实验方法
1.实验动物及细胞分离
采用新鲜的SPF级别Balb/c小鼠脾脏，采用不含酶的机械分离方法，获得脾细胞悬液。利用丙酮(TC)后离心的方法分离出脾源性内皮祖细胞。
2.细胞培养
使用DMEM/F12(1:1)培养基，含10％fetalbovineserum(FBS)、4mmol/LL-glutamine、100U/ml青霉素和100ug/ml链霉素，将内皮祖细胞转移至利于其生长的培养板内，停靠于37℃、5％CO2下。
3.细胞形态及分泌能力的监测
采用光学显微镜对细胞的形态进行观察，同时用流式细胞术测定细胞的增殖和分泌能力。
4.细胞磁标记
将10ug的锰灰石磁性粉末(MSPIO)和150ug的聚谷氨酸溶液冷却至室温后混合，形成磁性Fe3O4-合成聚合物复合物。将培养得到的细胞接种于培养瓶中，加入合成聚合物复合物，并在37℃，5％CO2中磁标记24小时，形成MSPIO磁性标记内皮祖细胞。
5.磁标记细胞的7.0TMR成像
将MSPIO磁性标记的内皮祖细胞制成细胞悬浮液，以10×10^6个细胞/ml的浓度置于极性光学清晰的85mm直径吸附瓶中。利用7.0TMR成像技术进行分析。
结果
1.成功培养出小鼠脾源性内皮祖细胞，且细胞形态、增殖能力、分泌能力均符合内皮祖细胞特点。
2.利用MSPIO和线性聚谷氨酸复合，成功对内皮祖细胞进行磁标记，且磁标记后的内皮祖细胞在MR和光显微镜下均呈现高信号。
3.磁标记细胞的7.0TMR成像与非磁标记细胞相比，具有更高的识别度和成像质量。
结论
本研究采用小鼠脾源性内皮祖细胞，成功研究了其在MRI技术下的单细胞成像技术，证明了内皮祖细胞在7.0TMR成像技术下的高成像质量。这一研究可为内皮祖细胞研究提供新的方法和手段，也可为细胞治疗等领域提供有益的参考作用。