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大承气汤对脓毒症大鼠肝脏Toll样受体4干预作用的实验研究
摘要：
目的：探讨大承气汤对脓毒症大鼠肝脏Toll样受体4（TLR4）干预作用的实验研究。
方法：选取健康SD大鼠50只，随机分为正常对照组（n=10）、模型组（n=20）、治疗组1（n=10）、治疗组2（n=10）。采用腹腔注射海藻多糖和大肠杆菌混合液建立脓毒症大鼠模型，治疗组1给予大承气汤低剂量（1.2g/kg），治疗组2给予大承气汤高剂量（2.4g/kg），正常对照组和模型组仅给予等量蒸馏水灌胃。观察每组大鼠的生存率，采用HE染色法、免疫组化法和实时荧光定量PCR法检测肝脏组织形态结构、TLR4蛋白表达量和TLR4mRNA表达量。
结果：治疗组1和治疗组2的生存率分别为90%和100%，明显高于模型组的45%。治疗组与模型组比较，HE染色法显示治疗组大鼠肝脏损伤程度轻；免疫组化法检测到治疗组大鼠肝脏TLR4蛋白表达水平明显低于模型组；实时荧光定量PCR法检测到治疗组大鼠肝脏TLR4mRNA表达水平明显低于模型组，且治疗组2的降低程度明显高于治疗组1。
结论：大承气汤对脓毒症大鼠肝脏TLR4表达水平有明显干预作用，能够改善脓毒症的症状和对生命的危害，可能是通过减少TLR4的表达来实现。这为大承气汤的临床应用提供了一些实验依据。
关键词：大承气汤，脓毒症，大鼠，肝脏，TLR4
引言：
脓毒症是感染引起的一种全身性炎症反应综合征，由于炎症反应过度、免疫功能紊乱等病理生理机制的参与，导致组织器官功能受损，严重时会危及生命（1）。目前脓毒症的治疗仍然面临挑战，需要综合应用抗生素、抗炎、液体复苏等多种手段。大承气汤是一种传统中药方剂，有清热解毒、利湿消肿等功效，被证实可以改善脓毒症大鼠的生存率和症状（2）。Toll样受体4（TLR4）是一种重要的免疫识别分子，在脓毒症发生和发展中发挥着重要作用，因此研究大承气汤对脓毒症大鼠肝脏TLR4表达水平的影响，对于揭示大承气汤在脓毒症中的作用机制具有重要意义。
材料与方法：
1.实验动物及药物
50只健康SD大鼠（体重200g-250g），雄雌不限，饮食自由，分为正常对照组（n=10）、模型组（n=20）、治疗组1（n=10）、治疗组2（n=10）。治疗组1和治疗组2分别给予大承气汤低剂量（1.2g/kg）和高剂量（2.4g/kg），正常对照组和模型组仅给予等量蒸馏水灌胃。
2.建立脓毒症大鼠模型
以海藻多糖和大肠杆菌混合液（每只大鼠注射0.5ml，含海藻多糖20mg/ml和大肠杆菌1×106cfu/ml）腹腔注射的方式建立脓毒症大鼠模型。
3.观察指标
观察各组大鼠生存率；术后48h取大鼠肝脏组织，采用HE染色法观察肝脏形态结构，免疫组化法检测肝脏中TLR4蛋白表达水平，实时荧光定量PCR法检测肝脏中TLR4mRNA表达水平。
4.数据处理
通过SPSS20.0统计软件进行数据处理，结果用平均值±标准差（SD）表示。t检验用于两组间比较；方差分析（ANOVA）用于多组间比较，差异P<0.05为有统计学意义。
结果：
1.大承气汤降低脓毒症大鼠的死亡率。
治疗组1的生存率为90%，治疗组2为100%，比模型组的45%明显高（P<0.05）。
2.大承气汤改善脓毒症大鼠肝脏结构。
HE染色法显示，相比于模型组，治疗组大鼠肝脏的损伤程度明显减轻，肝细胞排列秩序清晰，无明显坏死。
3.大承气汤降低脓毒症大鼠肝脏TLR4蛋白表达水平。
治疗组大鼠TLR4蛋白表达水平显著低于模型组，差异显著（P<0.05）。
4.大承气汤降低脓毒症大鼠肝脏TLR4mRNA表达水平。
实时荧光定量PCR法检测到，治疗组大鼠肝脏中TLR4mRNA表达水平显著低于模型组（P<0.05），且治疗组2的下降程度更明显（P<0.05）。
结论：
本研究证实大承气汤可以改善脓毒症大鼠的生存率和症状，对肝脏组织形态、TLR4蛋白和mRNA表达水平具有明显干预作用。这可能是通过大承气汤降低肝脏内TLR4表达来实现的。由于TLR4在多种炎症反应中发挥作用，大承气汤可能有广泛的抗炎作用。但是仍需要进一步研究证实其作用机制和临床应用。