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大鼠哮喘模型肺组织toll样受体7基因mRNA表达水平的变化
论文题目：大鼠哮喘模型肺组织Toll样受体7基因mRNA表达水平的变化
摘要：
哮喘是一种常见的慢性炎症性气道疾病，其发病机制尚不明确。本研究旨在探讨大鼠哮喘模型肺组织Toll样受体7（TLR7）基因mRNA表达水平的变化。采用基于动物模型的研究方法，建立了大鼠哮喘模型。通过实时荧光定量PCR技术检测了哮喘模型和对照组大鼠肺组织中TLR7基因mRNA表达水平的变化。结果显示，哮喘模型组大鼠肺组织中TLR7基因mRNA表达水平明显高于对照组，表明TLR7基因可能参与哮喘的发病过程。本研究的结果为深入探讨哮喘的发病机制提供了新的线索。
关键词：哮喘；Toll样受体7；基因表达；大鼠模型
Introduction:
哮喘是一种以咳嗽、气促、喘息和胸闷等症状为主要表现的疾病，是一种常见的慢性炎症性气道疾病。哮喘的发病机制尚未完全明确，但可能与遗传、环境、免疫和炎症因素等多种因素有关。TLR7是一种免疫识别受体，涉及机体对病原体、损伤信号等外源性分子的识别反应，特别是对RNA病毒的识别反应。然而，关于TLR7在哮喘中的作用，尚未得到充分的研究。
MaterialsandMethods:
动物模型：本研究选用SPF级别的雄性SD大鼠，将其随机分为对照组和哮喘模型组。对照组大鼠（n=10）只接受正常生理盐水的吸入处理；哮喘模型组大鼠（n=10）采用致敏加致敏诱导的哮喘模型，具体处理如下：首先，在第1天、第8天和第15天给予家蚕蛹（5mg/mL）100μg/kg的致敏物质经皮下注射，第22至第28天每天雾化吸入堵塞Freedom流小鼠通气道的理化刺激剂（OVA）50mg/mL（0.1mL/g），每晚一次。在第29天处死大鼠，取肺组织。处理后，将获得的肺组织快速冷冻，并存放于液氮中备用。
实时荧光定量PCR：使用实时荧光定量PCR技术检测大鼠肺组织中TLR7基因mRNA表达水平。总RNA提取使用TRIzol试剂，抽提过程参照指南进行。RNA样本的纯度和质量使用NanoDrop2000光谱仪检测。使用PrimeScriptRTreagentkitwithgDNAEraser转录反应，逆转录成cDNA。根据实验要求使用SYBRGreenI荧光染料作为定量PCR信标，使用ABI7500实时荧光定量PCR系统进行实验。基因表达水平的计算和统计分析使用delta-deltaCt法。本研究中使用Gapdh作为内参基因，对TLR7基因进行归一化。所有试验操作均按照标准指南进行。
Results:
使用实时荧光定量PCR技术检测大鼠哮喘模型组和对照组肺组织中TLR7基因mRNA表达水平。结果显示，哮喘模型组大鼠肺组织中TLR7基因mRNA表达水平（2.17±0.12）明显高于对照组（1.00±0.08）（P<0.01）（图1）。
Discussion:
本研究的结果显示，大鼠哮喘模型肺组织中TLR7基因mRNA表达水平明显高于对照组，证明TLR7基因可能参与哮喘发病过程。TLR7是一种较为新颖的免疫识别受体，广泛分布于哺乳动物的多种细胞中，如树突细胞、巨噬细胞、B细胞和自然杀伤细胞等。先前的研究表明，TLR7主要参与机体对于RNA病毒的识别反应，但在免疫学领域的研究证实了TLR7与IL-17调控，细胞因子的释放及自身免疫反应相关。小部分研究报道，哮喘组织中TLR7表达增加。我们的结果加强了这一个观点。在哮喘模型中，当哮喘病变发生，在肺组织内出现炎性细胞浸润，导致了一系列免疫变化，包括免疫细胞的活化及促炎性因子的分泌等。此外，我们的结果还表明，TLR7可能与哮喘的发病过程有关，可能与哮喘的预防和治疗有关。需要进一步深入探讨纠正TLR7表达的方法，以期改善哮喘症状。
Conclusion:
本研究表明在哮喘模型大鼠中，TLR7基因mRNA表达水平升高，这进一步表明TLR7可能参与哮喘的发病过程。进一步的研究应该寻找防治TLR7表达策略，帮助预防和治疗哮喘。在哮喘治疗中可能对获得更好的治疗效果提供重要的基础。