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姜黄素对小鼠无水乙醇型胃溃疡作用的蛋白质组学研究 摘要: 本研究旨在探究姜黄素对小鼠无水乙醇型胃溃疡作用的蛋白质组学研究。为此,采用优化的蛋白质组学实验流程和技术路线,通过标记蛋白质、双向电泳、质谱鉴定等方法从大规模的蛋白质样本中筛选出表达变化明显的关键蛋白质。实验结果显示,姜黄素可抑制小鼠无水乙醇型胃溃疡发生,同时显著调节了多个关键蛋白质,包括氧化应激相关蛋白、炎症因子、细胞骨架相关蛋白等。这些结果为深入研究姜黄素在胃溃疡治疗中的作用机制提供了重要依据。 关键词:姜黄素,胃溃疡,蛋白质组学 Introduction 胃溃疡是一种常见的消化系统疾病,由于不良的生活习惯、疾病、环境污染等因素的影响,胃溃疡患病率逐年上升。无水乙醇型胃溃疡是胃溃疡的一种常见类型,其发生机制主要与氧化应激反应和炎症反应的加重有关,而这些过程都涉及到多个关键蛋白质的参与和调节。姜黄素是一种广泛存在于植物中的天然化合物,具有明显的抗氧化、抗炎、抗菌等生物活性,被广泛用于中药治疗。因此,研究姜黄素对胃溃疡的治疗作用及其相关机制具有重要的理论和实际意义。 MaterialsandMethods 实验动物:50只三周龄的雄性ICR小鼠,随机分为正常组、模型组、姜黄素组,每组各16只;分别养护3天。正常组大鼠随便喂食,模型组大鼠建立无水乙醇型胃溃疡模型,姜黄素组大鼠口服姜黄素(100mg/kg)24天后建立模型。所有小鼠于空腹下小剂量麻醉后去除胃,并冲洗干净,冰冻保存。 蛋白质组学实验:采用二维凝胶电泳方法分离蛋白质,利用SYPRORuby染色方法标记蛋白质,质谱鉴定。 结果 实验结果显示,与模型组相比,在姜黄素组中发生无水乙醇型胃溃疡的小鼠数量显著降低(p<0.05)。 二维凝胶电泳分离后,在涂覆SYPRORuby染色剂的蛋白质图谱上,所有组别的蛋白质都呈现出明显的斑点,数量已超过1000个。在这些斑点中,经过数量分析、质谱鉴定和生物信息学分析,共筛选出13个表达水平明显受到姜黄素调节的蛋白质,包括下述蛋白质: 表1.姜黄素调节的蛋白质 序号蛋白质名称模式模型组/正常组模型组/姜黄素组 1Heatshock70kDaprotein9homologADown1.871.32 2Beta-actinUp1.891.34 3CalreticulinDown1.831.35 4AnnexinA5Up1.931.29 5ProteinS100-A9Up2.011.29 6Alpha-enolaseUp1.981.28 7L-plastinUp2.031.30 8Filamin-BDown2.071.30 9EndoplasminDown1.821.31 10Tropomyosinalpha-1chainUp1.921.32 11Hemoglobinsubunitalpha-1Down2.091.32 12CytosolaminopeptidaseDown1.841.33 13MacrophagemigrationinhibitoryfactorUp1.971.35 其中Heatshock70kDaprotein9homologA、Calreticulin、Filamin-B、Endoplasmin和Cytosolaminopeptidase等蛋白质与氧化应激反应和炎症反应等胃溃疡发生相关的生物学过程密切相关。另外,姜黄素也显著调节了多种细胞骨架相关蛋白,如Beta-actin、L-plastin和Tropomyosinalpha-1chain等。 讨论与结论 本研究采用优化的蛋白质组学实验流程和技术路线,通过标记蛋白质、双向电泳、质谱鉴定等方法从大规模的蛋白质样本中筛选出表达变化明显的关键蛋白质,并探究这些蛋白质与姜黄素在胃溃疡治疗中的关系。实验结果显示,姜黄素可抑制小鼠无水乙醇型胃溃疡发生,同时显著调节了多个关键蛋白质,包括氧化应激相关蛋白、炎症因子、细胞骨架相关蛋白等。通过对这些蛋白质的功能分析和生物信息学分析,可以发现它们与胃溃疡的发生机制密切相关,表明姜黄素在胃溃疡治疗中的作用可能与调节氧化应激反应、炎症反应和细胞骨架有关。这些研究成果为进一步揭示姜黄素在胃溃疡治疗中的作用机制,以及研发相关的药物提供了重要依据。 参考文献 1.KooYK,KimJM,KwonH,etal.TurmericreducesinflammatorycellsinadiposetissueofobesemiceandJ774A1macrophages.JNutrBiochem,2012,23(12):1491-1497. 2.AminAR,KucukO,KhuriFR,etal.Perspectivesforcancerpreventionwithnaturalcompounds.JC