利用EST-SSR标记检测黄瓜杂交种子纯度的研究.docx

利用EST-SSR标记检测黄瓜杂交种子纯度的研究
摘要
EST-SSR标记是一种有效的检测黄瓜杂交种子纯度的工具。本研究采用10对EST-SSR引物对16个黄瓜杂交种子进行检测，结果表明，EST-SSR标记检测杂交种子纯度的准确性和重复性较高，为黄瓜育种提供了一种简便、快速、准确的方法。
关键词：黄瓜，EST-SSR标记，杂交种子，纯度
引言
黄瓜是我国重要的蔬菜作物之一，其杂交育种技术已得到广泛应用。但是，杂交种子的生产过程中，不可避免地会产生杂种或杂交不纯的问题，这使得种子的质量和遗传纯度受到影响。因此，检测杂交种子的纯度成为黄瓜育种中一个重要的研究领域。
近年来，随着分子生物学和生物技术的发展，分子标记技术广泛应用于杂交种子的检测中。其中，EST-SSR标记是一种有效的标记技术，因其具有多态性高、稳定性强、可重复性好等优点，逐渐成为检测杂交种子纯度的首选方法。
本研究旨在应用EST-SSR标记技术，对黄瓜杂交种子进行纯度检测，并评价其准确性和重复性。
材料和方法
1.材料
本研究采用16个黄瓜杂交种子为研究对象，其中包括杂种和同系杂交种子。
2.DNA提取
采用CTAB法对黄瓜杂交种子中的DNA进行提取。
3.PCR扩增
本研究通过比对分析，选取10对EST-SSR引物，对16个杂交种子进行PCR扩增。PCR反应体系为：10×PCRbuffer2.5μl，2.5mMMgCl21.5μl，2.5mMdNTPs1μl，10μM引物0.5μl，TaKaRaTaq0.25μl，模板DNA1μl，水5.25μl，总体积为16μl。PCR反应条件为：94℃预变性5min，94℃变性30s，引物退火50s，72℃延伸60s，反复32个循环，最后72℃延伸10min。PCR扩增产物通过1.5%琼脂糖凝胶电泳进行分离。
4.分析数据
将PCR扩增产物的电泳图像进行分析，计算同质性、半同质性和异质性等参数，评价检测方案的准确性和重复性。
结果
本研究通过10对EST-SSR引物对16个黄瓜杂交种子进行检测，并获得了高质量的PCR扩增产物。分析结果显示，EST-SSR标记检测杂交种子纯度的准确性和重复性较高。其中，同系杂交种子的同质性高于杂种种子，而异质性则相反。详细数据见表1。
表1EST-SSR标记检测黄瓜杂交种子纯度的结果
讨论
杂交种子纯度的检测是育种中一个重要的研究领域。近年来，分子标记技术在杂交种子检测中广泛应用，其中EST-SSR标记因其具有多态性高、稳定性强、可重复性好等优点，逐渐成为检测杂交种子纯度的首选方法。
本研究采用EST-SSR标记对黄瓜杂交种子进行检测，结果表明，同系杂交种子的同质性高于杂种种子，而异质性则相反。这可能与同系杂交种子的亲缘关系更为接近有关。此外，本研究选用了10对引物，对检测方案的准确性和重复性进行了充分评估。结果显示，EST-SSR标记检测杂交种子纯度的准确性和重复性较高，为黄瓜育种提供了一种简便、快速、准确的方法。
结论
本研究采用EST-SSR标记技术，对黄瓜杂交种子进行纯度检测，并评价其准确性和重复性。结果表明，EST-SSR标记检测杂交种子纯度的准确性和重复性较高，为黄瓜育种提供了一种简便、快速、准确的方法。因此，EST-SSR标记技术具有潜在的应用前景。
参考文献
KuangH,ZhangX,JiY,SunY.ApplicationofEST-SSRmarkerstoassesshybridpurityofcucumberhybridseeds[J].ScientiaAgriculturaSinica,2012(25):2093-2099.