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乳糖操纵子的诱导原理中心法则(thecentraldogma)组成型表达(constitutivegeneexpression)诱导和阻遏表达协调表达(coordinateexpression)乳糖操纵子的结构和功能操纵子的组成: ----结构基因(structuralgene,SG):操纵元中被调控的编码蛋白质的基因 ----启动子(promoter,P):是指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列。 ----操纵基因(operator,O):是指能被调控蛋白特异性结合的一段DNA序列。 阻遏物基因(inhibitor,I),产生阻遏物(repressor)。 三个特异性序列: 操纵序列O(operator):阻遏蛋白结合位点。 启动子P(promoter):位于结构基因的上游。 CAP结合位点:环cAMP受体蛋白(分解代谢物激活蛋白)结合位点。 一个调节基因 lacI:编码阻遏蛋白,能结合于操纵序列位点。结构基因 Z编码β-半乳糖苷酶:将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖。 Y编码β-半乳糖苷透过酶:使外界的β-半乳糖苷(如乳糖)能透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜进入细胞内。 A编码β-半乳糖苷乙酰基转移酶:乙酰辅酶A上的乙酰基转到β-半乳糖苷上,形成乙酰半乳糖。当一个mRNA含有编码一个以上蛋白质的编码信息,而且这些蛋白质都是以独立的多肽被翻译时,这样的mRNA称之多顺反子mRNA。 多顺反子mRNA在细菌中是很普遍的。 多顺反子lacmRNA中的lacZ,lacY,lacA经翻译生成的产物分别生成代谢分解乳糖的三种酶 始终存在着一定的比例关系(Z:Y:A=5:2:1)乳糖操纵子的结构和功能lacZ、Y、A基因的转录是由lacI基因指令合成的阻遏蛋白R所控制。lacI一般和结构基因相毗连,但它本身具有自己的启动子和终止子,成为独立的转录单位。 由于lacI的产物是可溶性蛋白,按照理说是无需位于结构基因的附近。它是能够分散到各处或结合到分散的DNA位点上。阻遏蛋白的负调控(negativecontrolofrepressor)TheLacOperon:WhenGlucoseIsPresentButNotLactoseTheLacOperon:WhenLactoseIsPresentButNotGlucose 乳糖操纵子诱导物为什么选用IPTG作诱导物?为什么选用IPTG作诱导物?为什么选用IPTG作诱导物?乳糖操纵子的CAP正调控(PositiveControlofCAP)乳糖操纵子的CAP正调控(PositiveControlofCAP)乳糖操纵子的CAP正调控(PositiveControlofCAP)乳糖操纵子的CAP正调控(PositiveControlofCAP)乳糖操纵子的协调调控(coordinateregulation)Lac操纵子基因表达受阻遏蛋白和CAP的双重调控TheLacOperon:WhenLactoseIsPresentButNotGlucoseTheLacOperon:WhenNeitherLactoseNorGlucoseIsPresentLac操纵子基因表达受阻遏蛋白和CAP的双重调控生物学意义???本底表达小结