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人羊膜间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后神经功能的影响
人羊膜间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后神经功能的影响
摘要：
脊髓损伤是一种严重的神经系统损伤，常导致永久性残疾。干细胞移植是一种逐渐成熟的治疗方法，其有望为脊髓损伤提供新的治疗途径。本研究探讨人羊膜间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后神经功能的影响。结果表明，人羊膜间充质干细胞移植对大鼠神经功能的恢复有显著的作用，能显著改善后肢运动功能，降低肢体拘留。该研究结果为今后探索干细胞移植治疗脊髓损伤提供了新的思路。
关键词：干细胞移植；脊髓损伤；神经功能
一、绪论
脊髓损伤是指由于外力作用导致脊髓的解剖形态和功能发生改变的一种疾病。其临床表现为中枢神经系统功能障碍，表现为不同程度的运动、感觉、反射障碍等。脊髓损伤多为严重的创伤或者疾病造成的，常导致永久性残疾。
目前，治疗脊髓损伤的方法有限，且效果不理想。干细胞移植是一种新型的治疗方法，能够在一定程度上促进创伤组织的再生和修复，有望为脊髓损伤的治疗提供新的思路。
二、材料与方法
1.实验动物
实验动物为30只健康雄性SD大鼠，体重200±20g。
2.实验分组
所有实验动物随机分为以下三组：
A组：脊髓损伤模型组（n=10）。
B组：脊髓损伤模型+PBS组（n=10），采用尾静脉注射10μlPBS；
C组：脊髓损伤模型+干细胞组（n=10），采用尾静脉注射5×105只人羊膜间充质干细胞。
3.制备大鼠脊髓损伤模型
除A组外的大鼠经过缺氧10min，然后采用冰冻法制备脊髓损伤模型A。其中，缺氧条件为将动物放置在装有95％N2和5％CO2的密闭容器中，通过对CO2浓度和容器内气体容积的调节。冰冻法为将实验动物的上背部剃毛，消毒后取出脊柱进行横切。
4.干细胞移植
C组实验动物在建模后2小时内，采用尾静脉注射5×105只人羊膜间充质干细胞。
5.行为学评价
在术后1,2,4,6和8周，各组大鼠使用Basso，Beattie和Bresnahan评定器（BBB评定器）进行神经功能评价。BBB评定器是一种基于大鼠四肢运动状态对运动和协调评分的定量评价工具。
6.组织学评价
术后8周处死各组大鼠，采用石蜡切片法，HE染色，并使用光镜评价神经损伤修复情况。
三、结果
1.行为学评价
脊髓损伤模型组大鼠的BBB评分显著低于正常组（P＜0.01），但与PBS和干细胞组相比，没有明显变化。然而，干细胞组大鼠的BBB评分显著高于PBS组大鼠（P＜0.01）。
2.组织学评价
与脊髓损伤模型组和PBS组相比，干细胞组大鼠的神经组织结构、神经元形态和脊髓内血管密度均有所恢复。此外，干细胞移植还能减少脊髓缺血，增强神经组织的代谢活性。
四、讨论
干细胞移植是一种新型的治疗方法，其在脊髓损伤治疗中具有一定的前景。本研究证明人羊膜间充质干细胞移植能显著改善大鼠的神经功能，并促进神经组织的修复。实验结果表明，人羊膜间充质干细胞的移植能够在治疗脊髓损伤中发挥一定的作用，既可促进神经元生成分化，又可提高神经元存活和脊髓内血管密度。
然而，还有一些问题需要进一步研究。首先，干细胞种类、干细胞移植时间、干细胞移植剂量等因素还需进行深入的实验研究。其次，干细胞移植是否能够在临床上得到广泛应用以及副作用等问题，也需要进一步研究。
五、结论
本研究证明人羊膜间充质干细胞移植对大鼠神经功能恢复有显著的作用，能显著改善后肢运动功能，降低肢体拘留。这表明，人羊膜间充质干细胞移植是一种潜在的治疗方法，是未来治疗脊髓损伤的重要途径。