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人诱导性多潜能干细胞(iPS)系的建立 人诱导性多潜能干细胞(inducedpluripotentstemcells,iPSCs)的建立 摘要: 人诱导性多潜能干细胞(iPSCs)是一种能够通过基因重编程方法从成体细胞中重新获得多潜能状态的细胞。本文综述了人iPSCs的建立过程,包括关键的实验技术和策略。此外,我们还阐述了人iPSCs在再生医学中的应用潜力以及目前面临的挑战。 1.引言 人诱导性多潜能干细胞是通过转录因子的重新编程,从成体细胞中重获得多潜能状态的细胞。这种技术的发展极大地推动了再生医学的进展,为疾病的治疗和组织的再生提供了新的可能性。 2.iPSCs的建立过程 人iPSCs的建立需要以下几个关键步骤:选择合适的成体细胞源、选择适当的转录因子、转染和表达转录因子、维持iPSCs的稳定性。 2.1成体细胞源 选择成体细胞源对于iPSCs的建立至关重要。通常使用的细胞源包括表皮细胞、血液细胞和成纤维细胞等。不同的细胞源在重编程效率和稳定性上可能存在差异。 2.2转录因子的选择 转录因子是实现基因重编程的关键因素。最早经常使用的转录因子是Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc。但是随着技术的发展,新的因子如Nanog和Lin28也被包括在转录因子的组合中。 2.3转染和表达转录因子 为了将转录因子导入目标细胞中,需要使用适当的转染方法。目前常用的方法有病毒载体转染和非病毒载体转染两种。病毒载体转染效率高但存在成为插入突变和肿瘤形成的风险。非病毒载体转染则相对安全但效率较低。 2.4维持iPSCs的稳定性 稳定地维持iPSCs的多潜能状态是成功建立iPSCs的关键。这需要细胞内的重编程因子持续表达,并且防止细胞向特定的细胞系分化。常用的方法包括使用特定培养基和小分子化合物。 3.iPSCs在再生医学中的应用潜力 人iPSCs具有不受限的自我更新能力和多向分化潜能,因此具备广泛的应用潜力。目前已经在再生医学中取得了一些重要的突破,如组织再生、细胞替代疗法和疾病建模等。然而,尚存在许多挑战,如安全性、效率和质量控制等问题。 4.结论 人诱导性多潜能干细胞的建立为再生医学带来了巨大的希望。通过综合应用不同的实验技术和策略,建立持续稳定的iPSCs线可为疾病治疗和组织再生提供新的途径。然而,还需进一步研究和努力解决目前面临的挑战,促进iPSCs的更广泛应用。 参考文献: 1.TakahashiK,MurakamiM,YamanakaS.Roleofthephosphoinositide3-kinasepathwayinmouseembryonicstem(ES)cells.BiochemBiophysResCommun.2005;334(4):1149-1155. 2.YuJ,etal.Inducedpluripotentstemcelllinesderivedfromhumansomaticcells.Science.2007;318(5858):1917-1920. 3.TakahashiK,TanabeK,OhnukiM,etal.Inductionofpluripotentstemcellsfromadulthumanfibroblastsbydefinedfactors.Cell.2007;131(5):861-872. 4.VierbuchenT,OstermeierA,PangZP,KokubuY,SüdhofTC,WernigM.Directconversionoffibroblaststofunctionalneuronsbydefinedfactors.Nature.2010;463(7284):1035-1041. 5.ZhouT,BendaC,DuzingerS,etal.Generationofinducedpluripotentstemcellsfromurine.JAmSocNephrol.2011;22(7):1221-1228.