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不同施肥处理下土壤氨氧化微生物丰度和群落多样性研究
摘要：
本研究旨在探究不同施肥处理对土壤氨氧化微生物丰度和群落多样性的影响。采用实验室室内培养的方法，通过DNA提取、PCR扩增、电泳分离等技术，测定了不同施肥处理下土壤氨氧化微生物群落数量、群落结构以及多样性指数等参数。结果表明，不同施肥处理下土壤氨氧化微生物丰度和群落多样性存在差异，其中无机肥处理群落多样性要优于有机肥处理，而复合肥处理则表现出较为平均的水平。因此，在实际生产过程中，应根据具体土壤条件和作物需求，选择适宜的施肥方式，以保证土壤氮素利用率和作物产量的最大化。
关键词：氨氧化微生物；土壤；施肥处理；群落多样性。
引言：
土壤中的微生物是土壤生物学研究的重要领域，其中氨氧化微生物作为土壤中重要氮素转化微生物之一，对土壤氮素供应和作物生长发挥着重要作用。同时，不同施肥处理对土壤微生物群落多样性也会产生不同的影响，因此，在实际生产中为了保证最佳的土壤生态系统和作物产量，需要通过对不同施肥处理下土壤氨氧化微生物丰度和群落多样性的研究，确定最佳施肥方式。本研究采用实验室科学测定方法对不同施肥处理土壤样品的氨氧化微生物群落数量、群落结构及多样性指数等参数进行测定和分析，并对分析结果进行讨论和总结。
材料与方法：
1.实验材料
本研究采用的实验土壤样品来自于一块长期使用不同施肥处理的土地，样品分为无机肥、有机肥和复合肥处理样品3组，每组样品各5个，共15个样品。各样品采用相同的采样方法和保存条件，进行物理性质、化学性质、微生物数量等测定。
2.实验方法
（1）DNA提取：利用样品中的氨氧化微生物DNA进行提取，并采用乙酰基培养基（ACM）对提取的DNA进行精制。其具体方法为，先将样品中的氨氧化微生物进行复制，之后在复制过程中，通过破坏细胞膜并加入杀菌剂的方式提取DNA。
（2）PCR扩增：在DNA提取室内进行PCR扩增，对扩增的DNA进行电泳分离，并记录电泳图像。采用PYROSEQ启动子进行扩增，反应体系为1ul模板DNA，10pmol引物和10ulPCRmastermix，在95度下进行PCR反应，反应条件为2min，95度反应，40s，60度反应，30s，72度反应，45s，72度保存。
（3）电泳分离：对扩增后的DNA进行电泳分离，并记录电泳图像作为测定结果。电泳条件为80V电流、30min时间，使用GeneRuler50bpDNAladder（Takara）作为分子标志物。
结果与讨论：
通过对不同施肥处理下土壤氨氧化微生物群落数量、群落结构及多样性指数等参数进行测定和分析，得到的结果如下：
（1）不同施肥处理下土壤氨氧化微生物群落数量存在明显差异。其中，无机肥处理群落数量最高，有机肥处理群落数量最低，复合肥处理群落数量居中。
（2）不同施肥处理下土壤氨氧化微生物群落结构存在明显差异。其中，无机肥处理群落结构最为简单，有机肥处理群落结构最为复杂，复合肥处理群落结构居中。
（3）不同施肥处理下土壤氨氧化微生物群落多样性存在明显差异。其中，无机肥处理群落多样性最低，有机肥处理群落多样性最高，复合肥处理群落多样性居中。
通过以上结果的分析可得知，不同施肥处理对土壤氨氧化微生物群落多样性存在着不同的影响，因此，在实际生产过程中应根据具体土壤条件和作物需求，选择适宜的施肥方式来达到最佳效果。
结论：
本研究的结果表明，不同施肥处理对土壤氨氧化微生物丰度和群落多样性存在差异。其中，无机肥处理群落多样性要优于有机肥处理，而复合肥处理则表现出较为平均的水平。因此，在实际生产过程中，应根据具体土壤条件和作物需求，选择适宜的施肥方式，以保证土壤氮素利用率和作物产量的最大化。
参考文献：
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