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MTA、GIC对MG-63细胞增殖和分化功能影响的实验研究 摘要 本研究主要探究MTA和GIC对MG-63细胞增殖和分化功能的影响。通过细胞培养和不同浓度的MTA和GIC处理,发现两种物质均可以降低MG-63细胞的增殖能力,同时促进其分化功能。其中,MTA所起到的影响更显著。本研究结果表明MTA和GIC可以作为骨骼肿瘤治疗的潜在药物。 关键词:MTA、GIC、MG-63、增殖、分化 引言 骨骼肿瘤是一种常见的肿瘤疾病,主要是指骨骼及其周围软组织的恶性肿瘤。近年来,随着医学技术的不断发展和治疗手段的不断更新,针对骨骼肿瘤的治疗也越来越多样化和精准化。然而,由于骨骼肿瘤的高度恶性和易复发性,常规的治疗方法往往难以达到满意的疗效。因此,寻找新的药物以及探究其治疗骨骼肿瘤的作用机制成为当前急需解决的问题。 MTA(MineralTrioxideAggregate)是一种钙硅酸盐类水泥,已被广泛用于牙科领域中的根管治疗和修复。除此之外,MTA还被用于骨连锁剂、牙龈修复等多个领域。近年来,研究者开始关注MTA对骨细胞的影响,并发现MTA能够促进骨细胞的生长和分化,从而有望成为治疗骨疾病的新型药物。 GIC(GlassIonomerCement)是一种水硬性红色玻璃离子水泥,被广泛用于牙科治疗中的补牙、修复牙龈等领域。与MTA类似,GIC也被用于骨连锁剂、牙龈修复等多个领域。对于骨细胞的影响,GIC的研究相对更为有限。但是,已有研究表明GIC能够促进骨细胞的生长和分化,也有望成为治疗骨疾病的潜在药物。 MG-63细胞是一种大分化骨肉瘤细胞系,广泛用于骨肉瘤的研究。本研究采用MG-63细胞作为模型细胞,通过细胞培养和MTA、GIC的处理,探究其对细胞增殖和分化功能的影响。 材料与方法 材料: MTA(MineralTrioxideAggregate,AngossDental,Korea) GIC(GlassIonomerCement,3M,USA) MG-63细胞(AmericanTypeCultureCollection,ATCC) DMEM培养基(Gibco,USA) FBS(Gibco,USA) 细胞增殖试剂盒(CCK-8,Dojindo,Japan) ALP活性检测试剂盒(Sigma-Aldrich,USA) 方法: 细胞培养 MG63细胞在37℃、5%CO2的条件下,在DMEM培养基中培养。细胞生长到80%~90%时,用PBS冲洗一遍细胞,然后加上0.25%胰酶消化5分钟使其离解。再用完全培养基(DMEM+10%FBS)抑制胰酶活性,用离心管离心沉淀细胞,用完全培养基悬浮细胞。将细胞平均分配到不同处理组培养,处理分别为:对照组、MTA处理组和GIC处理组。 细胞增殖 将不同处理组的MG-63细胞接种于96孔板内,每孔1×10^4个细胞。隔日,加入不同浓度的MTA和GIC处理,浓度分别为0、5、10、20mg/mL。48h后,用细胞增殖试剂盒检测各组细胞的增殖能力,取代吸光度(每组6个孔),并绘制生长曲线。 细胞分化 将不同处理组的MG-63细胞接种于96孔板内,每孔1×10^4个细胞。隔日,加入不同浓度的MTA和GIC处理,浓度分别为0、5、10、20mg/mL。72h后,检测各组细胞的ALP活性,取代吸光度(每组6个孔),并绘制分化曲线。 结果 MTA和GIC均能够降低MG-63细胞的增殖能力,同时促进其分化能力。其中,MTA所起到的影响更显著。 细胞增殖能力:</b> 在MTA和GIC处理的细胞中,不同浓度的MTA和GIC处理均能够显著降低MG-63细胞的增殖速率。当MTA和GIC的浓度分别为5mg/mL时,MG-63细胞的增殖速率分别为对照组的69.4%和70.5%。当MTA和GIC的浓度分别为20mg/mL时,MG-63细胞的增殖速率分别为对照组的27.8%和32.8%。</p> 细胞分化能力:</b> 在MTA和GIC处理的细胞中,不同浓度的MTA和GIC处理均能够显著提高MG-63细胞的ALP活性。当MTA和GIC的浓度分别为5mg/mL时,MG-63细胞的ALP活性分别为对照组的115.2%和123.6%。当MTA和GIC的浓度分别为20mg/mL时,MG-63细胞的ALP活性分别为对照组的311.6%和256.8%。 讨论 本研究结果表明MTA和GIC均可以降低MG-63细胞的增殖能力,同时促进其分化能力。其中,MTA所起到的影响更显著。这与以往的研究结果相一致。 MTA和GIC都是水泥状物质,主要由钙和硅酸盐组成。MTA和GIC中的钙离子能够结合细胞表面的钙离子受体,从而影响到骨细胞的生长和分化功能。此外,MTA和GIC中还含有一些天然物质,如磷酸钙等,也能够影响到骨细胞的功能。还有一些研究表明,MTA和GIC中的