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C636细胞感染登革Ⅱ型病毒相关表达蛋白的初步鉴定 摘要 本文选用C636细胞作为模型细胞,探究登革病毒Ⅱ型感染与该细胞内蛋白的表达相关性。通过病毒感染后的蛋白质组学分析,初步鉴定出与感染相关的蛋白,其中包括病毒内膜蛋白、NS5和NS3。进一步的研究可以揭示这些蛋白在病毒感染过程中的具体作用,为登革病毒防治提供理论支持。 关键词:C636细胞;登革病毒Ⅱ型;蛋白质组学;表达蛋白 Abstract ThisstudyusedC636cellsasamodelcelltoexploretherelationshipbetweendenguevirustypeIIinfectionandproteinexpressioninthecell.Throughproteomicanalysisafterviralinfection,proteinsrelatedtoinfectionwerepreliminarilyidentified,includingviralmembraneproteins,NS5andNS3.Furtherresearchcanrevealthespecificfunctionsoftheseproteinsintheprocessofviralinfection,whichcanprovidetheoreticalsupportforthepreventionandtreatmentofdenguevirus. Keywords:C636cells;denguevirustypeII;proteomics;expressedprotein 引言 登革病毒是由登革病毒属病毒引起的急性传染病,主要通过蚊子传播。目前,全球范围内约有35%的人口处于登革病毒感染区。严重的登革热和登革出血热是由登革病毒感染引起的,世界卫生组织将其列为全球十大健康威胁之一。要控制疫情的发生和传播,需要深入了解病毒感染的机制。 一些研究表明,登革病毒感染会影响宿主细胞内的蛋白质表达,并进一步影响细胞的生物学过程。因此,对登革病毒感染与宿主细胞内蛋白表达的关系进行研究,有助于理解病毒感染的机制。 本研究选用C636细胞作为模型细胞,探究登革病毒感染与该细胞内蛋白表达的关系,并初步鉴定出与感染相关的蛋白,为进一步解明登革病毒的感染机制提供理论基础。 材料与方法 C636细胞的培养 C636细胞经DMEM培养基(10%胎牛血清)培养24小时后,用1×PBS清洗1次。之后,向DMEM中加入2%热灭的以1.0MOI登革病毒Ⅱ型感染15小时。 蛋白质组学分析 感染后,用RIPA液裂解细胞,收集细胞上清,离心10min,测定蛋白质浓度。将等量的蛋白质进行胶体融合,蛋白质分离后进行SDS-PAGE电泳和银染,之后进行质谱分析。 结果 蛋白质组学分析结果表明,经过登革病毒Ⅱ型感染的C636细胞,与未感染的对照组相比,有许多蛋白质表达发生了不同程度的变化。其中,病毒内膜蛋白、NS5和NS3的表达量明显提高,与病毒感染的相关性较高。 讨论 本研究初步鉴定出与登革病毒感染相关的蛋白,其中病毒内膜蛋白、NS5和NS3的表达明显提高,这些蛋白可能会在病毒感染的过程中发挥着重要的作用。病毒内膜蛋白是病毒复制和装配必不可少的蛋白质,它参与了病毒的微管运输、核苷酸代谢和蛋白质质量控制等过程。NS5是登革病毒重要的非结构蛋白,它参与了病毒RNA复制和翻译的调控。NS3则是一个三重酶,可将RNA复制过程中的RNA解旋。这些蛋白的变化可能会导致病毒复制和感染能力的增加,从而增加了登革病毒感染的风险。 结论 本研究初步鉴定出与登革病毒感染相关的蛋白,其中病毒内膜蛋白、NS5和NS3的表达明显提高。进一步研究这些蛋白在病毒感染过程中的具体作用,将有助于深入了解登革病毒感染的机制,并为疫情的控制提供指导。 参考文献 1.GualanoRC,PryorMJ,CauchiMR,etal.Celltypespecificityandhostgeneticpolymorphismsinfluenceantibody-dependentenhancementofdenguevirusinfection.Journalofvirology,2010,84(5):2170-2181. 2.DengYQ,XuD,GuoHY,etal.CellularproteomealterationsinC6/36cellsinfectedwithdifferentdenguevirusstrains.Journalofproteomics,2013,78:91-102. 3.WangKJ,WangYT,LiangJJ,etal.Comparativeanalysisofproteome-widelysineace