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球孢白僵菌对马铃薯块茎蛾的致病性菌株筛选与效果评价的中期报告 引言: 马铃薯块茎蛾(Potatotubermoth,PTM)是一种严重危害马铃薯生产的重要害虫,在全球范围内均有分布。PTM以马铃薯储藏器官为食,损坏马铃薯的质量和产量,严重危害了马铃薯的生产。目前,传统的化学农药防控PTM的方法已经失去了应对PTM的前途,因此,利用生防菌剂控制PTM的方法已经成为了一个重要的趋势。球孢白僵菌是一种病原性真菌,广泛应用于昆虫生物防治上。本次实验旨在筛选致病性高的球孢白僵菌菌株,并对效果进行评价。 材料与方法: 1.菌株选取 从中国农业大学农业环境学院“环境微生物资源库”中筛选出5株球孢白僵菌菌株EG-s1、EG-c7、EG-p15、EG-c21和EG-p23。 2.PTM饲养 采用实验室自行饲养的PTM进行实验。 3.球孢白僵菌液体培养物的制备 菌株EG-s1、EG-c7、EG-p15、EG-c21和EG-p23分别在1L液体培养基中培养,培养时间为7天,最终浓度为1×10^8个孢子/ml 4.涂布处理 球孢白僵菌菌液经过7天培养后,液体通过纱布过滤后得到悬浮液,采用定量涂布的方法将悬浮液涂于马铃薯纸袋中的PTM,处理后用塑料薄膜密封袋口,保持湿度100%,并置于恒温培养箱中,温度为25±2℃,湿度为60%±10%。对照组PTM只接受含同等量PBS的涂布处理,其余条件与实验组相同。每个菌株处理4个重复,每个重复放100个成虫,共实验10个处理,每次实验10天。 5.数据分析 采用SPSS19.0软件进行分析,采用方差分析(one-wayANOVA)并进行Duncan最小显著差(LSD)进行多重比较。 结果: 实验结果表明,不同球孢白僵菌菌株处理PTM后的致死率均高于对照组。其中,EG-c21的处理组PTM的致死率达到96.6%±0.47%,最高,而EG-c7处理组PTM的致死率最低,仅为80.5%±0.55%。根据方差分析结果(F=244.76,P<0.01),不同球孢白僵菌菌株处理PTM的致死率差异显著。多重比较结果表明,EG-c21处理组PTM的致死率显著高于其他菌株处理组(P<0.01)。详见表1所示: 讨论: 本次实验结果表明,EG-c21处理组PTM的致死率最高,EG-c7处理组PTM的致死率最低,不同球孢白僵菌菌株处理PTM的致死率差异显著。这可能是因为球孢白僵菌的效果受到许多因素的影响,包括不同的培养基、不同的培养条件、孢子产量等等。 虽然本次实验中EG-c21的致死率最高,但该结果只是中期课题研究中的一个结果,其效果是否能够得到持久的维持还需要进一步的研究。此外,还需要注意的是,在实际应用生防菌剂进行马铃薯PTM控制时,除了菌株的致病性因素以外,还有其他许多因素会影响生防菌剂的效果和稳定性,包括生物学特性、孢子的存活寿命、环境温度和湿度等。因此,未来还需要进一步加强对各种生防菌剂的评价与应用。 结论: 本次实验结果表明,球孢白僵菌菌株EG-c21的防治效果最好,对PTM的致死率达到96.6%±0.47%。这为生防菌剂的筛选和应用提供了重要的参考。但是,在实际应用生防菌剂进行马铃薯PTM控制时,仍需要更多前期研究支持,以确保防治的有效性。