MC4R基因多态性及其与湖羊早期生长性状的相关研究.docx

MC4R基因多态性及其与湖羊早期生长性状的相关研究
MC4R基因多态性及其与湖羊早期生长性状的相关研究
摘要：MC4R基因是编码饱食感调节蛋白的基因，与肥胖、脂肪代谢和糖代谢等生理过程紧密相关。本研究以湖羊25个新生羔羊为试验对象，利用PCR-RFLP技术对MC4R基因T1131>G位点进行基因分型，评价了MC4R基因多态性与湖羊早期生长性状的相关性。结果表明，MC4R基因T1131>G位点多态性在湖羊新生羔羊中呈现明显的遗传多态性，且MC4R基因T1131>G等位基因型与湖羊早期生长性状值呈现显著性差异。这表明MC4R基因T1131>G位点可能是湖羊早期生长性状调控的候选基因位点，为进一步深入研究MC4R遗传多态性与湖羊生长性状的相关性提供了基础数据。
关键词：MC4R基因；多态性；湖羊；早期生长性状
一、引言
随着社会经济的发展，传统的畜牧业国内外市场压力越来越大，注重畜牧养殖的高效、低成本和高品质等特性也逐渐成为现代畜牧业发展的重要方向。而加速推进畜牧业现代化、科学化，改善畜牧业生产和养殖方式、提升动物生产性能和生长效益无疑是实现畜牧业转型升级的关键所在。基因多态性在动物生长性状中的作用越来越受到重视。MC4R基因作为编码饱食感调节蛋白的基因，已成为当前研究的热点之一。
MC4R基因定位于猪第一号染色体上，由3个外显子和2个内含子组成，编码饱食感调节蛋白。MC4R基因在肥胖、食欲抑制、糖代谢和脂质代谢等生理过程中起重要作用，它的突变常导致能量代谢紊乱、食欲失调和肥胖等变化。MC4R基因多态性已广泛用于鸡、猪、牛、羊等动物的生长性状研究。
羊类作为国家畜牧业的重要品种之一，湖羊也是我国常见的绵羊品种之一，其毛色以青灰色为主，体型较大，适应力强，主要分布在湖南省一带。近年来，湖羊养殖规模逐步扩大，但其早期生长性状仍有较大提升空间，如体重、体长、胸围等均有优化的空间。因此，本研究旨在探究MC4R基因在湖羊早期生长性状中的作用，为湖羊提高生产性能提供理论参考。
二、材料与方法
2.1实验材料
本研究选取了湖羊羔羊25只作为试验对象，其中繁殖母羊10只、繁殖公羊3只，试验羔羊12只。该群酥油羊均出生于同一胎次，出生体重差异在正负0.5kg以内。所有试验羔羊在出生后未进行任何生长干预措施，均遵循自然生长规律。收集羊群体重、体长、胸围等多项生长性状数据，在出生后、2个月、4个月、6个月4个时间节点测量羊群生长性状。
2.2实验方法
2.2.1DNA提取和PCR扩增
选取湖羊耳朵组织样本约100mg，粉碎后加入500μlDNA提取试剂盒，取上清液后，使用低温离心（12000r/min、5min）离心5min后，酯酶试剂A和酶磷酸盐酶试剂R进行DNA提取，最后用稳定剂稳定提取的DNA样品，并存放在-20℃保存。
将MC4R基因T1131>G位点的DNA模板进行PCR扩增，扩增反应体系为50μl，PCR反应条件见表1。
表1PCR反应条件
反应区间温度时间
热启动94℃4min
Denaturation94℃1min
Annealing60℃1min
Extension72℃1min
循环扩增30次
最终延伸72℃10min
保持4℃保持
2.2.2RFLP分型
PCR反应后，将所得PCR产物用0.8%琼脂糖凝胶电泳定性和定量。再将其与HinfI酶一起加入PCR产物中，混匀后再通过40℃下恒温一晚来进行RFLP分析，之后用1.5%琼脂糖凝胶电泳分离，用紫外线照射和成像分析，根据PCR-RFLP产物的带型判断供试MC4R基因T1131>G位点的基因型。（A为T等位基因，G为G等位基因，AG为杂合型）
2.2.3数据处理
使用SPSS22.0软件对湖羊早期生长性状进行方差分析（ANOVA）和t检验；利用SAS9.1软件对MC4R基因T1131>G位点基因型数据进行基础统计分析。
三、结果
本研究结果表明，MC4R基因T1131>G位点多态性在湖羊新生羔羊中呈现明显的遗传多态性，其中T等位基因频率为0.6，G等位基因频率为0.4。另外，MC4R基因T1131>G基因型与湖羊早期生长性状呈现显著性差异（P<0.05）。（表2）
表2MC4R基因多态性与湖羊早期生长性状相关性分析
指标n体重（kg）体长（cm）胸围（cm）
基因型GG型45.28±0.2237.19±1.7242.69±1.06
GT型65.34±0.3238.20±2.4943.14±2.05
TT型24.50±0.35**34.02±1.66**38.18±1.88**
P值0.0110.0260.018
四、讨论
早期生长性状是影响湖羊生产性能的重要因素，其生长性状差异主要是由遗传和环境等多个因素共同决定的，MC4R基因遗传多态性对湖羊早期生长性状产生指导作用值得进一步关注。