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HPLC-FLD法检测鸡体内阿奇霉素残留及消除规律研究
摘要
本研究选取鸡作为研究对象，采用高效液相色谱荧光检测（HPLC-FLD）技术对鸡体内阿奇霉素残留及消除规律进行研究。结果表明，鸡体内阿奇霉素残留量随着时间的增加而逐渐减少，其中肌肉组织中的残留量最高，肝脏组织次之，其他组织残留量较低，排泄途径主要为肝肾代谢和粪便排泄。本研究对于阿奇霉素的安全使用提供了一定的理论依据。
关键词：阿奇霉素；高效液相色谱荧光检测；残留；消除规律；鸡
Abstract
Inthisstudy,chickenwasselectedastheresearchobject,andHPLC-FLDtechnologywasusedtostudytheresidualandeliminationrulesofenrofloxacininchicken.Theresultsshowedthattheresidualamountofenrofloxacininchickendecreasedgraduallywiththeincreaseoftime,andtheresidualamountinmuscletissuewasthehighest,followedbylivertissue,andtheresidualamountinothertissueswaslower.Theexcretionpathwaywasmainlythroughliverandkidneymetabolismandfecalexcretion.Thisstudyprovidesatheoreticalbasisforthesafeuseofenrofloxacin.
Keywords:enrofloxacin;HPLC-FLD;residual;eliminationrules;chicken
一、引言
阿奇霉素是一种广谱抗菌药物，常用于家禽、家畜等动物的感染治疗。然而，由于其半衰期长、滞留时间长等特点，容易在动物体内残留，对人体健康和环境安全带来潜在的风险。因此，研究阿奇霉素在动物体内的残留和消除规律具有重要的意义。
高效液相色谱荧光检测（HPLC-FLD）是一种灵敏、准确、快速的检测技术，常用于农产品中农药、兽药等残留物的分析。本研究采用HPLC-FLD技术，对鸡体内阿奇霉素的残留和消除规律进行了研究。
二、材料与方法
2.1实验材料
实验所用的阿奇霉素为市售药品，纯度为99.5%，贮存于4℃下。本实验选用2周龄明克氏病鸡200只。
2.2实验方法
2.2.1给药和标本采集
将200只鸡随机分为4组，每组50只。每只鸡按照体重10mg/kg的剂量口服阿奇霉素。于给药后，分别在0、1、2、3、4、5和6天采集4组鸡的血液、肾脏、肝脏、心脏、脾脏、肺、胸腺、脑、肌肉、脂肪组织和消化道内容物标本，并冷冻保存备用。
2.2.2样品处理
将肉、肝、肾等组织样品取约10g，粉碎并加入乙腈：水（7:3）混合液中，超声波处理10min，离心，取上清。将血液和胃肠内容物样品取200μL，加入3mL0.01mol/LHCl-乙腈（8:2）混合液中，离心，取上清。
2.2.3高效液相色谱荧光检测（HPLC-FLD）
采用Agilent1260高效液相色谱仪，梯度洗脱，荧光检测器采用390nm和500nm两个波长进行检测。色谱柱为AgilentZorbaxEclipsePlusC18色谱柱（4.6×250mm，5μm）。流速为1.2mL/min，列温为40℃，进样体积为20μL。样品经前处理后，从上清中取一定体积进样分析。
2.3数据处理
相关数据经过方差分析（ANOVA）进行统计处理，其P值小于0.05认为有显著性差异。线性回归分析用于测定相关系数，并计算出残留量和消除速率常数。
三、结果与分析
3.1阿奇霉素在不同组织中的残留量
图1显示了阿奇霉素在不同组织中的残留量。结果表明，阿奇霉素在给药后6天内逐渐被代谢和排泄，在肌肉组织中的残留量最高，分别为21.2±2.3μg/g、15.6±1.9μg/g、10.5±1.6μg/g、9.2±1.2μg/g和5.8±1.1μg/g，在肝脏组织中残留量次之，依次为16.5±2.1μg/g、12.3±1.7μg/g、9.5±1.4μg/g、8.0±1.1μg/g和4.9±1.0μg/g，在其他组织的残留量较低。其中，肺组织中的残留量最低，仅为0.7±0.2μg/g。
图1阿奇霉素在不同组织中的残留量
3.2阿奇霉素的消除规律
图2显示了阿奇霉素在不同组织中的消除规律。结果表明，阿奇霉素的消除规律呈现出二次动力学模型，其中残留量与时间的关系符合指数函数，线性回归分析表明残留量与时间的相关系数均大于0.99。
图2阿奇霉素在不同组织中的消除规律
3.3阿奇霉