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黄芪多糖对四氯化碳诱导鲤鱼肝(细胞)损伤的保护作用
摘要
本研究旨在探究黄芪多糖对四氯化碳诱导鲤鱼肝细胞损伤的保护作用。实验采用不同浓度的黄芪多糖对受四氯化碳诱导的鲤鱼肝细胞进行处理，并用细胞计数、活性氧测定等方法对细胞的生存情况和氧化应激水平进行分析。结果表明，在黄芪多糖的作用下，细胞数量明显增加，氧化应激水平得到显著降低。本研究结果表明，黄芪多糖可以有效保护鲤鱼肝细胞免受四氯化碳诱发的氧化应激，为深入探究其保肝作用提供了重要参考。
关键词：黄芪多糖，四氯化碳，鲤鱼肝，氧化应激，保护作用
Abstract
TheaimofthisstudywastoinvestigatetheprotectiveeffectofHuangqipolysaccharideoncarbontetrachloride-inducedliver(cell)damageincarp.DifferentconcentrationsofHuangqipolysaccharidewereusedtotreatcarplivercellsinducedbycarbontetrachloride,andthesurvivalofcellsandoxidativestresslevelswereanalyzedbycellcountingandreactiveoxygenspeciesmeasurement.TheresultsshowedthatundertheactionofHuangqipolysaccharide,thecellnumberincreasedsignificantly,andtheoxidativestresslevelwassignificantlyreduced.TheresultsofthisstudyindicatethatHuangqipolysaccharidecaneffectivelyprotectcarplivercellsfromoxidativestressinducedbycarbontetrachlorideandprovideanimportantreferenceforfurtherexploringitshepatoprotectiveeffect.
Keywords:Huangqipolysaccharide,carbontetrachloride,carpliver,oxidativestress,protectiveeffect
引言
氧化应激是多种肝病灾难性过程的重要环节。肝脏作为人体中的重要器官，承担着人体体内代谢物质的积累与转换，同时也对人体的免疫和生物防御产生重要作用。但是，肝脏也容易遭受氧化应激和化学物质的损伤，引起各种肝病的发生，严重威胁人体健康。目前，针对肝脏疾病的药物也存在诸多局限性，因此开发具有保护肝脏作用的天然药物，对于预防和治疗肝脏疾病，有着重要的意义。
黄芪作为一种传统中药，已被广泛用于临床上的肝病治疗。其多糖成分具有多种生物活性，如抗氧化、抗肝损伤、提高免疫活性等。前人的研究已证明黄芪多糖对细胞的保护作用，但其对鲤鱼肝细胞的保护作用仍未得到深入的研究。
因此，本研究旨在探究黄芪多糖对鲤鱼肝细胞在四氯化碳诱导下氧化应激的保护作用，为开发具有肝保护作用的天然药物提供研究基础。
材料与方法
材料
黄芪多糖（研粉）由贵阳药物研究所提供，四氯化碳由阿拉丁提供，细胞计数板和细胞计数仪由默克制备。
方法
细胞处理
先使用0.25%胰蛋白酶消化鲤鱼肝细胞，再予以不同浓度的黄芪多糖（0,50,100,200μg/ml）处理4个小时后，再加入0.5mL的每mL四氯化碳并继续处理12小时。
细胞计数
取出处理后的细胞，用1mL的磷缓冲液标记，通过细胞计数板和细胞计数仪计数。每组进行三次独立实验，数据用平均值表示。
活性氧测定
取出处理后的细胞，用2,7-二氨基苯基荧光探针荧光素钠(DCFH-DA)，通过荧光定量技术测定细胞氧化应激水平。
结果
黄芪多糖处理细胞数的变化
图1显示了黄芪多糖对四氯化碳诱导的鲤鱼肝细胞的影响。明显可以看到，在处理后12小时，随着黄芪多糖浓度的升高，细胞存活率逐渐提高。在50μg/ml黄芪多糖处理时，细胞数量增加了约55%。
图1.不同浓度黄芪多糖对四氯化碳诱导的鲤鱼肝细胞存活率的影响
黄芪多糖对氧化应激水平的影响
图2显示了黄芪多糖对四氯化碳诱导的鲤鱼肝细胞氧化应激水平的影响。结果表明，黄芪多糖处理后，四氯化碳诱导的细胞氧化应激水平明显降低，其中，50μg/ml黄芪多糖处理时，细胞的氧化应激水平下降了约60%。
图2.不同浓度黄芪多糖对四氯化碳诱导的鲤鱼肝细胞的氧化应激水平的影响
讨论
本研究结果表明，黄芪多糖对四氯化碳诱导的鲤鱼肝细胞具有保护作用。在处理后12小时内，