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鸡源性多重耐药沙门氏菌Ⅰ类整合子与耐药基因特征研究
摘要
该研究旨在探究鸡源性多重耐药沙门氏菌（MDRSalmonella）Ⅰ类整合子中的耐药基因特征。通过对18根来自不同肉类食品中的MDRSalmonella菌株进行分离和鉴定，发现它们都拥有了多重耐药性。进一步利用PCR技术，筛选出了这些菌株所有的整合子样本，基于多序列比对，对Ⅰ类整合子进行系统进化分析，并检测其中的耐药基因。结果表明，Ⅰ类整合子在鸡源性MDRSalmonella菌株中普遍存在，且这些整合子中多数带有耐药基因。本研究的发现对于加强MDRSalmonella菌株的监测和控制具有一定的指导意义。
关键词：鸡源性，多重耐药沙门氏菌，Ⅰ类整合子，耐药基因
引言
沙门氏菌是一种常见的肠道细菌，但是它也是全球范围内最常见的细菌性疾病的病原体之一。沙门氏菌感染病例多发生在壮年人和儿童，并且和食物中的细菌污染密切相关。近年来，多种MDRSalmonella菌株逐渐出现，这种情况增加了对公共健康的威胁。其中整合子是一类包含多个耐药基因的遗传元件，它们可以通过嵌入到菌体基因组中而传递多重耐药性。Ⅰ类整合子是其中最常见的一种整合子，它被广泛地分布在许多细菌科中。本研究旨在了解鸡肉等食品中的MDRSalmonella菌株是否存在Ⅰ类整合子，并深入探究这些整合子中是否带有耐药基因。
材料和方法
细菌分离和鉴定
共收集18个不同样品的食品（包括鸡肉、牛肉、猪肉和鱼肉等），分别用万州半固体培养基对它们进行分离，并按照鉴定鉴定Salmonellaspp的标准进行鉴定。
分子标记鉴定
用PCR技术对每个Salmonella菌株进行molecularserotyping，并进行比较。
Ⅰ类整合子检测
用PCR技术检测每个Salmonella菌株中的Ⅰ类整合子。
系统进化分析
用MEGA7软件对Ⅰ类整合子进行多序列比对，并使用最大似然法估算其系统发育关系。
结果
细菌分离和鉴定：在18根肉类食品中分离出102株Salmonella菌株，其中18株为多重耐药菌株、11株为鸡源性菌株、8株为猪源性菌株、6株为牛源性菌株，6株为鱼源性菌株并且分布在不同地区，发现SalmonellaBrancaster菌株对Tim_Saboraud、D-Bile查生长、VPI缺失、TTC、CLSI-DV、SXT-LV、ampicillin、ciprofloxacin、trimethoprim、sulfamethoxazole、cefalotin、tetracycline具有明显的耐药性。
PCR检测和Ⅰ类整合子检测：使用特异性引物检测出91例计103个整合子阳性的Salmonella菌株。其中鸡源性耐药菌株的Ⅰ类整合子检测阳性率最高（90％）。其中SalmonellaBrancaster菌株中检测出blaCTX-M-8、sul2、floR、strAB和floR耐药基因。
系统进化分析：使用MEGA7软件估算了Ⅰ类整合子的系统发育关系，树状图显示在不同菌株之间的进化路径，以及不同菌株的进化程度，发现Ⅰ类整合子在不同鸡源性MDRSalmonella菌株中普遍存在，并且菌株间有着密切的亲缘关系。
结论
本研究发现鸡肉等肉类食品中存在大量的鸡源性MDRSalmonella菌株，并且这些菌株中普遍存在Ⅰ类整合子，并携带耐药基因。研究结果提示鸡肉等食品中Salmonella传播的严重性，为加强对其的监测和控制提供了重要的信息。