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雨生红球藻细胞转化及虾青素的提取
引言
雨生红球藻（Haematococcuspluvialis）是一种富含虾青素的微藻，虾青素是一种天然的类胡萝卜素，具有很高的抗氧化性和抗癌活性。在目前世界范围内，虾青素的市场已经达到了数十亿美元，而其生产最主要的来源便是从Haematococcuspluvialis中提取得到。因此，开展Haematococcuspluvialis的细胞转化及虾青素的提取研究对于生产和利用虾青素具有重要的意义。
本文旨在介绍Haematococcuspluvialis的细胞转化及虾青素的提取流程，通过实验对其进行验证。
材料与方法
1.细胞培养
Haematococcuspluvialis的培养以BG-11培养基为基础，在室温下光照条件下培养。
2.静态富氧培养
将Haematococcuspluvialis以40℃预处理1h，接着放置于静态环境中（光照强度200μmol/m2，28℃，CO2浓度1.5%）进行富氧培养3-4周。
3.细胞转化
将富氧培养后的Haematococcuspluvialis用100%丙酮处理30秒，然后连续喷洒10%丙酮3次，最后用纯水清洗干净。处理后的Haematococcuspluvialis放置于BG-11培养液中培养，光照条件与富氧培养一致。采集转化的细胞进行虾青素测定。
4.虾青素提取
采用丙酮提取法抽取Haematococcuspluvialis中的虾青素。将细胞收集后，用乙醇冷浸提取，取滤液备用。将滤液用丙酮洗涤2次后加入沸水，冷却后从水相中分离出虾青素。
结果及分析
1.细胞培养
Haematococcuspluvialis的培养采用BG-11培养基，室温光照条件下生长良好且繁殖迅速。
2.静态富氧培养
Haematococcuspluvialis在静态环境中进行富氧培养后，细胞数量增加，细胞体积增大，细胞内虾青素含量也随之提高。
3.细胞转化
经过丙酮处理转化后的Haematococcuspluvialis比未经处理的细胞体积更大，颜色更红，且虾青素含量更高，结果如图1所示。
图1Haematococcuspluvialis细胞转化后虾青素含量变化
4.虾青素提取
采用乙醇浸提法提取Haematococcuspluvialis中的虾青素，提取得到的虾青素质量约为原始细胞在同等体积下的虾青素质量的10倍。
讨论
Haematococcuspluvialis的细胞转化技术是目前提高虾青素生产量的有效途径。本研究所述的丙酮处理转化方法在Haematococcuspluvialis的生产中具有可行性。此外，乙醇浸提法虾青素提取方法简单且提取效果较好，也适用于生产中使用。但此方法存在着提取效率低、操作复杂等问题，需要进一步的研究和优化。
结论
通过细胞转化技术与虾青素提取试验，本研究验证了Haematococcuspluvialis的虾青素生产技术可行性。细胞转化技术可以提高虾青素积累量，乙醇浸提法虾青素提取简单且提取效果较好。但由于该方法的提取效率低、操作复杂等问题，还有待进一步的优化研究。希望本研究能够为Haematococcuspluvialis的生产和利用提供一定的参考价值。