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高糖对人脐静脉内皮细胞肾素前体表达的影响及初步机制探讨
摘要：
背景：糖尿病的发生与发展与血管内皮细胞的功能紊乱和肾素-血管紧张素系统的异常激活有关。本研究旨在探讨高糖对人脐静脉内皮细胞（HUV-EC-C）肾素前体（Prorenin）表达的影响及可能的分子机制。
方法：通过培养HUV-EC-C细胞并加入高糖处理组和正常糖组，在一定时间的培养后，采用Elisa和WesternBlot等方法检测HUV-EC-CProrenin的表达水平；同时对HUV-EC-C中参与调控Prorenin基因表达的一些分子进行检测。
结果：与正常糖组相比，高糖处理组在时间和剂量依赖性的影响下，显著增加了HUV-EC-CProrenin的表达水平（P＜0.05）。同时，高糖组中c-Myc的表达也显著升高，三磷酸腺苷和PROX1的表达水平则显著下降（P＜0.05）。
结论：高糖可通过促进c-Myc的表达和抑制三磷酸腺苷和PROX1的表达来增加HUV-EC-CProrenin的表达水平，这可能是导致高糖状态下肾素与肾素-血管紧张素系统过度激活的重要分子机制之一。
关键词：高糖，内皮细胞，肾素前体表达，c-Myc，三磷酸腺苷，PROX1
Introduction：
糖尿病是一种常见的代谢性疾病，其中多种代谢紊乱可导致内脏器官的结构和功能发生改变，从而增加心血管疾病等并发症的发生率。与此同时，糖尿病与肾素-血管紧张素系统的过度激活和血管内皮细胞信号转导途径的异常有关，而这些异常的发生与发展可能会导致慢性肾脏疾病等严重后果。肾素是一种主要参与肾素-血管紧张素系统调节的激素，而其前体Prorenin在血管壁内膜层和间质细胞中的表达和分泌受到了广泛关注。在高糖状态下，内皮细胞中肾素-血管紧张素系统的活化情况往往更加明显，而Prorenin对于肾素过度激活的参与可能也是内皮细胞功能紊乱的一个重要因素。因此，探讨高糖对Prorenin的影响及其可能的分子机制对于进一步理解糖尿病的发生机制和预防并发症有着重要的意义。
MaterialsandMethods：
1.细胞培养：将新鲜脐带的静脉组织通过消化和吸附法分离出HUV-EC-C细胞，并将其培养在含有10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的培养液中，同时在配制时设置高糖培养液处理组和正常糖培养液处理组。
2.高糖处理：将高糖培养液的葡萄糖浓度设置为25mM，正常糖培养液的葡萄糖浓度为5.5mM，细胞经过各自培养液组的处理后，放置于37℃，5%CO2环境中培养不同的时间和剂量以达到不同实验条件。
3.蛋白质检测：采用WesternBlot法检测HUV-EC-C细胞抽取的蛋白质水平，并使用Elisa法检测肾素前体的表达水平。
4.实时PCR：通过PCR法检测分子I和II在Prorenin的转录表达水平，同时检测c-Myc、三磷酸腺苷和PROX1的表达水平。
Results：
1.高糖可促进Prorenin的表达：与正常糖组相比，高糖处理组表达HUV-EC-CProrenin的水平显著增加，且时间和剂量依赖关系显着（P＜0.05）。
2.高糖抑制三磷酸腺苷和PROX1的表达：相比于正常糖组，高糖处理组中的三磷酸腺苷和PROX1的表达显著下降（P＜0.05），并且主要表达c-Myc的基因的表达水平显著上升（P＜0.05）。
Conclusion：
本研究结果初步证实高糖可通过促进c-Myc的表达和抑制三磷酸腺苷和PROX1的表达来增加HUV-EC-CProrenin的表达水平，从而促进肾素-血管紧张素系统的过度激活和内皮细胞功能紊乱。这一机制的发现为探究糖尿病的发生机制和防治并发症提供了一定的帮助。