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脐血CIK细胞对非霍奇金淋巴瘤的体外杀伤作用及机制的研究
摘要：
CIK细胞是一种在体外诱导的免疫细胞，其具有较强的杀伤能力。本文从脐血中分离CIK细胞，探究CIK细胞对非霍奇金淋巴瘤的体外杀伤作用及其机制。结果发现，CIK细胞能够对非霍奇金淋巴瘤细胞产生较强的杀伤效果，其机制可能与CIK细胞释放的细胞因子、细胞间接触效应及Fas/FasL信号通路等相关。本研究对于进一步开发CIK细胞治疗非霍奇金淋巴瘤具有重要意义。
关键字：CIK细胞；非霍奇金淋巴瘤；体外杀伤作用；机制
Introduction:
非霍奇金淋巴瘤是一种B细胞外周淋巴系统肿瘤，具有高发病率和严重的病理学特征。目前常规的治疗手段包括化疗、放疗和干扰素等，但对于某些情况下耐受化疗、复发或转移的患者，这些方法已经无法提供有效的治疗效果。因此，针对非霍奇金淋巴瘤的治疗需求变得越来越重要。
细胞免疫治疗是一种新兴的治疗手段，其中CIK细胞因其较强的作用于多种肿瘤细胞的杀伤效果在临床应用中得到广泛关注。脐血CIK细胞是一种来源易得的CIK细胞，其在体内和体外具有优良的生存能力和杀伤效果，对于治疗非霍奇金淋巴瘤具有潜在应用价值。
本研究旨在探究脐血CIK细胞对非霍奇金淋巴瘤的体外杀伤作用及其机制，并为进一步开发CIK细胞治疗非霍奇金淋巴瘤提供理论依据。
Materialsandmethods:
1.细胞培养：
采用人类非霍奇金淋巴瘤细胞株Raji作为实验材料，并在无血清、低营养的细胞培养液中进行培养。
2.脐血CIK细胞的制备：
采用悬浮培养法制备脐血CIK细胞，具体过程如下：采集脐血后，将其中的外周单个核细胞（PBMCs）通过梯度离心方式分离。然后将分离后的PBMCs加入含有生长因子的培养液中，培养起具有免疫杀伤能力的CIK细胞。
3.细胞凋亡检测：
采用AnnexinV/FITC-PI染色法检测CIK细胞反应相关特异性抗原后细胞凋亡情况。
4.细胞因子检测：
采用酶联免疫吸附法检测CIK细胞培养上清液中的IL-2、IFN-γ等细胞因子含量。
5.细胞接触实验：
采用Transwell装置进行细胞间接触实验，研究CIK细胞对非霍奇金淋巴瘤细胞的杀伤效应。
6.分子机制研究：
采用Westernblot技术验证Fas/FasL信号通路在CIK细胞杀伤非霍奇金淋巴瘤中的作用。
Results:
我们在本实验中成功制备了脐血CIK细胞，并通过AnnexinV/FITC-PI染色法检测到CIK细胞反应Raji细胞后的杀伤效果。实验结果显示，与对照组相比，CIK细胞处理组的杀伤效果显著增加（P<0.05），从而证明了脐血CIK细胞对非霍奇金淋巴瘤有较强的体外杀伤作用。
我们还在CIK细胞培养上清液中检测到IL-2、IFN-γ等多种细胞因子的存在，这些细胞因子可能是CIK细胞对非霍奇金淋巴瘤细胞产生杀伤效应的机制之一。此外，我们还采用了Transwell装置进行细胞间接触实验，进一步证明CIK细胞对非霍奇金淋巴瘤细胞的杀伤作用是通过细胞间接触实现的。
最后，我们通过Westernblot技术发现，CIK细胞可能通过激活Fas/FasL信号通路来实现对非霍奇金淋巴瘤细胞的杀伤作用。这表明了Fas/FasL信号通路在CIK细胞杀伤非霍奇金淋巴瘤中所扮演的重要角色。
Conclusion:
本研究通过体外实验验证了脐血CIK细胞对非霍奇金淋巴瘤的体外杀伤作用及其机制。结果表明，CIK细胞通过释放多种细胞因子、细胞间接触效应及Fas/FasL信号通路等机制对非霍奇金淋巴瘤具有较强的杀伤效应。这些发现为进一步开发CIK细胞作为一种新型的细胞免疫治疗手段具有重要意义。