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苜蓿(紫花、黄花)再生体系的建立及遗传转化 摘要 苜蓿作为优质牧草和绿肥作物,在农业生产中具有很高的价值。然而,传统的种植方法存在许多缺点。本文主要探讨了建立苜蓿再生体系和遗传转化的技术路线,介绍了利用植物生理学和分子生物学技术建立苜蓿再生体系的方法和进展,并阐述了应用遗传转化技术改良苜蓿的发展前景。同时,也提出了未来苜蓿再生体系和遗传转化研究的展望。 关键词:苜蓿、再生体系、遗传转化、植物生理学、分子生物学 Abstract Asanexcellentforageandgreenmanurecrop,alfalfahashighvalueinagriculturalproduction.However,traditionalcultivationmethodshavemanyshortcomings.Thispapermainlydiscussestheestablishmentofthealfalfaregenerationsystemandgenetictransformationtechnology,introducesthemethodsandprogressofusingplantphysiologyandmolecularbiologytechnologytoestablishthealfalfaregenerationsystem,andexpoundsthedevelopmentprospectsofimprovingalfalfathroughgenetictransformationtechnology.Atthesametime,thefuturedevelopmentprospectsofresearchonalfalfaregenerationsystemandgenetictransformationarealsoproposed. Keywords:alfalfa,regenerationsystem,genetictransformation,plantphysiology,molecularbiology 一、引言 苜蓿作为优质牧草和绿肥作物,在农业生产中具有很高的经济和社会价值。但是,由于种植难度大、生长缓慢、病虫害多等原因,限制了苜蓿的生产和应用。传统的苜蓿种植方法存在不少问题,如难以实现复壮、种子萌发率低、生产不稳定等问题。因此,如何提高苜蓿的生产效益成为当前研究的热点。建立苜蓿再生体系、开展遗传转化研究可以有效地提高苜蓿的繁殖和生产水平。 二、苜蓿再生体系的建立 苜蓿再生体系是指通过体外培养苜蓿组织,获得具备再生能力的植株的技术。苜蓿再生体系的建立,可以为遗传转化提供重要的材料。 (一)培养基 培养基是苜蓿再生体系的基础,对培养基中各成分的比例进行优化,可以提高再生能力。目前,常用的培养基有MS、B5、WPM等,其中MS培养基是最常用的。此外,不同生长阶段的苗期在培养基的成分要求和比例上也有一定差异。 (二)基因型 不同的基因型对再生体系的建立有着不同的适应性。已知的苜蓿品种中,混合型优势明显,再生率高;而单倍体则很难利用。此外,富含再生能力的组织类型主要有茎尖、叶片、幼嫩愈伤组织等。 (三)诱导体系 诱导再生体系一般采用激素诱导系统。多种激素的组合可以影响再生的质与量,如利用NAA和BA的组合能够获得较好的再生体系,以每半年左右再生率达到80%以上。 (四)预处理 预处理是指在培养前,对幼嫩愈伤组织进行低温处理、暴露光照等各种处理,以提高诱导再生能力。低温预处理是常用的方法,处理时间约为12-24小时。 上述方法可以有效地建立苜蓿再生体系,为遗传转化提供了可靠的基础。 三、苜蓿遗传转化技术 苜蓿的遗传转化技术在育种上具有广泛的应用前景。遗传转化技术主要分为植物质体转化和非植物质体转化两大类。 (一)植物质体转化 植物质体转化是利用植物的细胞生理学和分子生物学技术手段,通过植物体外培养的方式,将外源DNA导入到植物细胞中,形成转化植株的方法。植物质体转化技术已经成为遗传改良作物的主要手段之一,也可用于育种的无性繁殖、基因函数分析和基因组测序等。 (二)非植物质体转化 非植物质体转化是指利用生物技术手段,将外源DNA不依赖于体外培养的方式导入植物体内的方法。这种转化技术适用于大多数植物物种,但效率较低,不如植物质体转化。 (三)遗传转化的优点 遗传转化技术可以通过改变植物自身基因,增强植物的耐逆性、抗病性、生长发育、产量等性状。同时,还可以利用外源基因的功能实现植物的性状改良。目前,已有研究应用遗传转化技术带来的显著性状改良,如抗除草剂、抗病毒等。 四、结论 苜蓿的再生体系与遗传转化技术为苜蓿的高效育种提供了可靠的技术支撑。在如今遗传改良的大背景下,建立苜蓿再生体系和遗传转化技术的研究