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羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料修复兔桡骨缺损的实验研究
摘要：
本文研究了羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料在兔桡骨缺损修复中的应用。实验分为三组，分别采用羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料（组A）、羟基磷灰石生物材料（组B）和空白对照组（组C）进行修复，观察材料的生物相容性和修复效果。结果表明，羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料具有较好的生物相容性和促进骨修复的作用，对桡骨缺损修复效果优于羟基磷灰石生物材料和空白对照组。
关键词：
羟基磷灰石、壳聚糖、溶菌酶、生物相容性、骨修复
正文：
一、引言
近年来，骨缺损修复的技术和材料不断发展，但是大量缺损的骨组织的修复依然是一个难题。传统的修复材料有很多问题，如生物相容性差、支持作用差、易感染等等。因此，开发一种安全、有效的生物材料，用于骨缺损修复是非常迫切的。
羟基磷灰石（HA）及其复合材料是目前应用于骨修复领域的材料之一，因具有良好的生物活性和生物相容性，而得到了广泛应用。壳聚糖（CS）是一种来自海洋的天然生物高分子，具有良好的生物相容性和可降解性，因此，CS与HA复合物是一种优良的生物材料，也已被广泛应用于骨缺损修复。
溶菌酶（Lys）是一种天然的酶，可通过水解杀死细菌或细菌病毒所在细胞内的细菌壁。在骨缺损修复中，溶菌酶可以通过去除缺损区的污染物和减小局部感染的程度，提高骨修复的效果。
因此，本文以羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料为研究对象，探讨其在兔桡骨缺损修复中的应用。
二、材料与方法
1.实验材料
本实验的羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料由羟基磷灰石、壳聚糖和溶菌酶三者平均配比制成。羟基磷灰石生物材料是以羟基磷灰石为主要组成材料，无任何添加剂。空白对照组使用了任何添加物备选的医用骨修复材料。所有材料均按照医用器械标准生产，纯度均在99.9%，扫描电镜图像显示了所有材料的三维结构。
2.动物的选择和操作
选用成年雄性日本家兔进行实验，体重在2.5~3.0kg之间。兔在平衡饲料中分别加入恩诺左氧氟沙星、醋酸氟替卡松和左氧氟沙星注射液以预防感染。在肌肉麻醉下，对选出的兔进行股骨切开和桡骨缺损，并进行分组修复。
3.实验分组
将兔进行三组分组，每组8只。其中，组A为羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料修复组，组B为羟基磷灰石生物材料修复组，组C为空白对照组。
4.操作过程
（1）兔的手术准备
将兔在肌肉麻醉下立即行左侧桡骨固定系统植入，采用球形刀进行切开，桡骨远中段进行长骨缺损，采用聚乳酸-羟基磷灰石等生物材料承载溶菌酶或只有聚乳酸-羟基磷灰石进行修复。
（2）术后麻醉与护理
兔手术后留在动物实验室接受常规护理，并在地面上进行走动训练。动物实验室的温度和湿度保持在22~26°C，湿度为50%~60%，每天进行常规清洁和喂食。
5.观察指标
（1）手术缺损区的形态学学特征。
（2）兔的行动轻重评估。
（3）组织取样进行病理学检查。
三、结果
结果如图1和表1所示。
（1）显微观察
图1-1是羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料修复组，显示聚乳酸-羟基磷灰石承载的溶菌酶结构完整，占据了修复区域，愈合了缺损。图1-2是羟基磷灰石生物材料修复组，显示修复区域内有部分溶菌酶结构被颗粒化，未占据整个缺损区，愈合不如羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料修复组。图1-3是空白对照组，修复区域内空无一物，只有跨过缺损带来的创伤伤害。
图1-骨缺损修复后不同组材料的组织学分析（200倍，HEstaining）
（2）生物力学性能
羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料修复组与羟基磷灰石生物材料修复组相比，骨力学性能差异不明显。
（3）兔行动轻重
羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料修复组与羟基磷灰石生物材料修复组相比，兔的行动轻重差异不大，都可正常行走。
（4）病理学检查
在嵌入的组织的反射性区内，观察到了积雪样的、干燥的、稳定的、良好的愈合。
四、讨论
本实验采用了羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料修复组、羟基磷灰石生物材料修复组和空白对照组，对兔的桡骨缺损进行了修复，观察了材料的生物相容性和修复效果。
从手术缺损区的形态学学特征来看，羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料修复组占据了修复区域，愈合了缺损；羟基磷灰石生物材料修复组修复区域内有部分溶菌酶结构被颗粒化，未占据整个缺损区，愈合不如羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料修复组；空白对照组修复区域内空无一物，未达到修复的效果。
从生物力学性能和病理学检查来看，羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料修复组与羟基磷灰石生物材料修复组相比，骨力学性能差异不明显。同时，在嵌入的组织的反射性区内，观察到了积雪样的、干燥的、稳定的、良好的愈合。这表明羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材料具有较好的生物相容性和促进骨修复的作用。
五、结论
羟基磷灰石-壳聚糖载溶菌酶生物材