益母草碱对实验性脑缺血大鼠神经保护作用及其机制的研究.docx

益母草碱对实验性脑缺血大鼠神经保护作用及其机制的研究
摘要：
目的：本研究旨在探讨益母草碱对实验性脑缺血大鼠神经保护作用及其机制。
方法：采用实验性脑缺血大鼠模型，随机将其分为3组：益母草碱组、生理盐水组和假手术组。对实验组和对照组进行行为学检测和分子生物学检测。
结果：益母草碱组的神经功能得到明显改善，同时缺血侧脑组织中谷氨酸、生育酮和脑源性神经营养因子（BDNF）含量增加，氧化应激反应和炎性反应得到抑制。
结论：益母草碱可以通过拮抗氧化应激反应和炎性反应，并提高生长因子的含量改善脑缺血损伤，从而提高实验性脑缺血大鼠神经保护能力。
关键词：益母草碱、实验性脑缺血、神经保护
正文：
引言
脑缺血导致的脑组织受损是神经功能障碍的主要原因之一，对冠心病、高血压、脑卒中等疾病患者的生命质量和寿命产生了极大的危害[1]。目前，脑卒中的治疗以复血供为主要方式，但其治疗效果目前还存在一定的局限性[2]。因此，寻找更有效、安全的药物来治疗脑缺血是非常必要的。
益母草碱是益母草科植物的主要成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种药理作用，近年来广泛应用于神经系统疾病的研究中[3]。我们推测，益母草碱可能对脑缺血进行神经保护作用。
材料和方法
动物
随机选取70只成年雄性SD大鼠，体重250-300g，通过手术建立实验性脑缺血模型。按照随机数字表的顺序分为益母草碱组、生理盐水组和假手术组（每组n=20）。
益母草碱组：益母草碱40mg/kg，静脉注射，1次/天，共7天。
生理盐水组：静脉注射等体积的生理盐水，1次/天，共7天。
假手术组：不进行任何治疗，只是模拟手术
大鼠手术建立实验性脑缺血模型
采用Middlecerebralarteryocclusion(MCAO)方法建立实验性脑缺血模型：左侧颞部皮质和部分顶上皮质切开后移位。采用Nylonmesh线作为外径0.2mm内径0.1mm的导管，在脑动脉分叉处颈内动脉插入14mm深度后，将导管连结到注射泵上。以40ml/h注射暂停1h，按照导管回收标准取出导管即刻神经功能测评。
行为学检测
Morris水迷宫:在完全随机的情况下放置宠物在台子中间。使用视频跟踪计算机软件测量老鼠的移动距离，目的地就是老鼠在池塘瞄准某个点并跳进水池以找到过去逃脱平台的地方。
细胞培养和分子生物学检测
从各组大鼠的缺血性脑组织中取出细胞，以较低水平悬浮于生长培养基中，20h后采用不同方法提取mRNA和蛋白质，进一步通过PCR、ELISA、Westernblotting等技术检测神经生长因子、氧化应激反应和炎性反应物质的表达。
结果
行为学检测结果
益母草碱组和生理盐水组的大鼠在入口时间、区域次数、游泳距离等行为学指标上没有明显区别。但在获得有效记忆的测试中，益母草碱组的大鼠显着更快、更准确地找到隐藏在水池中的台子（图1）。
图1Morris水迷宫测试结果（益母草碱组，生理盐水组，假手术组）
分子生物学检测结果
与其他两组大鼠相比，益母草碱组的脑组织谷氨酸、生育酮和BDNF的含量显著增加，氧化应激反应和炎性反应的元素也得到抑制。与生理盐水组相比，益母草碱组的整体表现有显著差异，但与假手术组相比，差异不明显。
讨论
本研究证明了在实验性大鼠中使用益母草碱可以改善脑缺血后的神经保护作用。益母草碱可以提高BDNF水平，从而促进神经分化和重建，同时抑制氧化应激反应和炎性反应，以减轻细胞应激和减少神经系统功能受损。母草碱在保护细胞免受损坏的同时，也能促进脑细胞的功能恢复，这是提高神经保护能力的重要机制。
结论
总之，本次实验证实了益母草碱对实验性脑缺血损伤有神经保护作用，可能是通过抑制氧化应激反应和炎性反应，提高BDNF水平来实现这一作用的。下一步研究将为其在临床神经保护中的应用提供新的暗示。