海南五指山美花兰根部内生真菌多样性及其促生长作用研究.docx

海南五指山美花兰根部内生真菌多样性及其促生长作用研究
摘要
本研究对海南五指山美花兰内生真菌进行了分离鉴定，并探究了其对美花兰幼苗生长的促进效应。共分离到菌株29株，经形态学与分子生物学鉴定，归属于7个属，其中以蜜环菌属（Trichoderma）和拟红霉属（Penicillium）的分离率最高。选择了其中4株具有明显生长促进作用的真菌（分别为Trichodermaasperellum、Penicilliumrestrictum、Penicilliumcitrinum和Aspergillusawamori），进行育苗盆栽试验。结果表明，Trichodermaasperellum对美花兰幼苗生长的促进效果最为显著，可显著提高幼苗根长、株高、鲜重和干重。
关键词：美花兰；内生真菌；生长促进；Trichodermaasperellum
Abstract
Inthisstudy,endophyticfungiwereisolatedandidentifiedfromtherootsofCymbidiumensifoliumvar.misericorsinWuzhishan,Hainan,andtheireffectonseedlinggrowthwasexplored.Atotalof29strainsofendophyticfungiwereisolated,belongingto7genera.TrichodermaandPenicilliumhadthehighestisolationrate.Fourfungalstrains(Trichodermaasperellum,Penicilliumrestrictum,PenicilliumcitrinumandAspergillusawamori)withobviousgrowthpromotingeffectswereselectedforseedlingpotexperiments.TheresultsshowedthatTrichodermaasperellumhadthemostsignificanteffectonpromotingthegrowthofCymbidiumensifoliumvar.misericorsseedlings,andcouldsignificantlyincreasetherootlength,plantheight,freshweightanddryweightoftheseedlings.
Keywords:Cymbidiumensifoliumvar.misericors;endophyticfungi;growthpromotion;Trichodermaasperellum
引言
美花兰（Cymbidiumensifoliumvar.misericors）是白兰科兰属的一种兰花，是我国特有的珍稀植物。其花色丰富，色彩鲜艳，花朵大而美丽，是园林绿化和观赏盆景的重要物种。但是，美花兰生长周期长，育苗时间较长，目前还缺乏有效的育苗技术和方法，因此，研究如何提高美花兰的生长速度和质量具有重要意义。
内生真菌（Endophyticfungi）是生长在植物体内的一类真菌，能够与植物形成共生关系，并在植物的生长过程中起到一定的促进作用。近年来，研究发现内生真菌具有许多良好的生物学特性，如能够促进植物生长、调节植物生理代谢、提高植物抗病能力等。因此，研究美花兰内生真菌的多样性和潜在的促生长作用，对于提高美花兰的生长速度和质量具有重要的意义。本研究从海南五指山地区采集了美花兰根系样品，分离鉴定了其中的内生真菌，并通过育苗盆栽试验，探究了内生真菌对美花兰幼苗生长的促进效应，以期为美花兰的育苗与生长提供一定的技术支持。
材料与方法
材料
海南五指山地区采集的美花兰根系样品。
试剂
拟南芥盐土培养基（PDA，PotatoDextroseAgar）、小麦胚芽盐土培养基（MEA，MaltExtractAgar）、蔗糖甘露醇盐土培养基（SMA，Sucrose-mannitolAgar)。
方法
分离内生真菌
将美花兰根系样品进行表面消毒后分为5-6cm长的小段，再对其表面进行消毒。将小段依次放入PDA/PDAA培养基中进行分离，直至生长出单一型菌落，分别进行形态学鉴定。
形态学鉴定
首先观察细胞形态及产生孢子种类，然后进行颜色与质地等方案的鉴定。
分子生物学鉴定
选用ITS序列对分离得到的内生真菌进行鉴定。
育苗盆栽试验
将选择的4株内生真菌（Trichodermaasperellum、Penicilliumrestrictum、Penicilliumcitrinum和Aspergillusawamori）分别接种到美花兰种子上，种植入小麦胚芽盐土培养基中进行育苗