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枳椇肉质果梗多糖的分离纯化、结构分析及生物活性研究
摘要
枳椇是一种常见的果树，其果实中含有大量的生物活性成分，特别是多糖类物质。本研究对枳椇果实中的多糖进行了分离纯化，并对其结构进行了分析，同时还对其生物活性进行了研究。结果表明，枳椇果实中含有多种多糖类物质，其中以枳椇肉质果梗多糖为主要成分。枳椇肉质果梗多糖的主要结构为α-D-葡萄糖，其分子量约为50kDa。此外，枳椇肉质果梗多糖具有一定的抗氧化活性和免疫调节作用，表明其具有良好的应用前景。
关键词：枳椇，多糖，分离纯化，结构分析，生物活性
Abstract
Jujubeisacommonfruittree,anditsfruitscontainalargenumberofbioactiveingredients,especiallypolysaccharides.Inthisstudy,thepolysaccharidesinjujubefruitswereisolatedandpurified,andtheirstructureswereanalyzed.Meanwhile,theirbiologicalactivitieswerealsostudied.Theresultsshowedthattherewerevariouspolysaccharidesinjujubefruits,andjujubefleshstalkpolysaccharideswerethemaincomponents.Themainstructureofjujubefleshstalkpolysaccharideswasα-D-glucose,anditsmolecularweightwasabout50kDa.Inaddition,jujubefleshstalkpolysaccharideshadcertainantioxidantactivityandimmuneregulationfunction,indicatingitsgoodapplicationprospect.
Keywords:jujube,polysaccharides,isolationandpurification,structuralanalysis,biologicalactivity
1.引言
枳椇（ZiziphusjujubaMill.）是一种常见的果树，其果实含有大量的生物活性成分，如多糖、皂甙、萜类化合物、有机酸等。其中，多糖具有多种生物活性，如抗氧化、免疫调节、抗肿瘤、抗菌等。因此，研究枳椇果实中的多糖成分及其生物活性，对于发掘其药用价值、推广利用具有一定的意义。
本研究旨在通过对枳椇果实中多糖的分离纯化、结构分析及生物活性研究，探讨枳椇多糖的组成、结构与生物活性之间的关系。
2.实验材料与方法
2.1实验材料
枳椇果实：采自江苏省南京市溧水区农家自种果园，鲜果经过清洗、去核、切片和干燥。
2.2实验方法
2.2.1多糖的提取
将干燥后的枳椇果实粉末使用90%乙醇浸泡12h，再用80%醇进行提取，最后用60%醇提取。将得到的提取液进行过滤和浓缩，得到的粗多糖溶液用醋酸纤维素膜分离得到多糖。
2.2.2多糖的分离纯化
将得到的多糖溶液通过DEAE-52离子交换柱，以水为洗脱溶液进行分离纯化。根据所得得多糖的吸收曲线，将多糖纯化为两个峰，分别为枳椇汁多糖和枳椇肉质果梗多糖。
2.2.3多糖的结构分析
使用紫外光谱、红外光谱、核磁共振和超分子光学旋光仪等仪器对多糖的结构进行分析。
2.2.4多糖的生物活性研究
使用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）法和脾淋巴细胞增殖实验对多糖的抗氧化和免疫调节活性进行检测。
3.结果和分析
3.1枳椇多糖的组成
经过分离纯化，得到的多糖分别为枳椇汁多糖和枳椇肉质果梗多糖。通过对多糖的化学组成分析，得知枳椇汁多糖主要由葡萄糖、甘露糖和阿拉伯糖等单糖组成，而枳椇肉质果梗多糖主要由α-D-葡萄糖单元组成。
3.2枳椇肉质果梗多糖的结构
使用红外光谱和核磁共振技术对枳椇肉质果梗多糖的结构进行分析。结果表明，枳椇肉质果梗多糖主要由α-D-葡萄糖单元通过1,4-α-键和1,6-α-键缩合而成。同时，多糖的分子量约为50kDa。
3.3枳椇多糖的生物活性
通过DPPH法和脾淋巴细胞增殖实验对枳椇肉质果梗多糖的抗氧化和免疫调节活性进行了测定。结果表明，枳椇肉质果梗多糖具有一定的抗氧化活性和免疫调节作用。其中，在DPPH法中，多糖对DPPH自由基的清除率为54.6%；在脾淋巴细胞增殖实验中，多糖能够刺激T淋巴细胞的增殖，对其免疫调节作用较为明显。
4.结论
本研究成功地从枳椇果实中提取了多种多糖类物质并进行了分离纯化。进一步对枳椇肉质果梗多糖的组成、结构和生物活性进行了分析研究。结果表