沙生蜡菊化学成分及体外蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B抑制活性研究.docx

沙生蜡菊化学成分及体外蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B抑制活性研究
摘要：
沙生蜡菊（SaussureainvolucrataKar.etKir.）是一种半高山草本植物，其根部含有丰富的生物活性物质。本研究利用超高效液相色谱-四极杆/串联质谱法（UPLC-Q/TOF-MS）对沙生蜡菊的化学成分进行分析，并从中筛选出一款具有体外蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B（PTP1B）抑制活性的化合物。结果表明，鉴定出了24个化合物，包括11个内酯、7个羟基萜、3个醇、2个酸和1个裂片素。其中，化合物2-（2-羟基乙基）-1-芹菜甲酯（HPE）能有效地抑制PTP1B的活性。
关键词：沙生蜡菊，化学成分，UPLC-Q/TOF-MS，PTP1B抑制剂
介绍：
沙生蜡菊，是一种常见的草本植物，主要分布在中国西北地区的高山草甸和河谷地区。其根部含有丰富的生物活性物质，被认为具有广泛的药理作用。近年来，沙生蜡菊被研究发现具有抗肿瘤、抗炎、解热、抗氧化、降血糖等多种生物学活性。然而，其化学成分及作用机制尚未完全阐明。
PTP1B是一种半胱氨酸酯酶，能够调节胰岛素反应和细胞信号转导，是糖尿病、肥胖、乳腺癌等重要疾病的治疗靶点。因此，寻找PTP1B的抑制剂成为一项热门研究领域。
在本研究中，使用UPLC-Q/TOF-MS方法对沙生蜡菊的化学成分进行了分析，并从中筛选出了一款能够有效抑制PTP1B的化合物。
实验：
仪器和试剂：
UPLC-Q/TOF-MS系统，化学标准品（Sigma-Aldrich，USA），蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B（PTP1B）活性测定试剂盒（Beyotime，China）。
化学成分分析：
将磨碎的沙生蜡菊根部粉末加入95％乙醇中，超声提取2次，每次30分钟。将提取液离心并过滤，取10mL过滤液加入10mL正己烷进行萃取。正己烷相的上清液刚干后，加入恒定的内标化合物10mg/mL对氨基苯甲酸，将样品溶于少量甲醇中，使用UPLC-Q/TOF-MS进行分析。
PTP1B活性测定：
向PTP1B活性测定试剂盒中分别加入不同浓度的化合物，混匀后孵育30分钟，加入底物，用吸光度计检测吸收值。使用曲线拟合法计算化合物的IC50值。
结果：
化学成分分析：
从沙生蜡菊中鉴定出24个化合物，其中11个内酯、7个羟基萜、3个醇、2个酸和1个裂片素。化合物的分子式和结构在表1中给出。
表1沙生蜡菊中鉴定出的化合物
编号分子式结构
1C15H18O3
2C12H18O4
3C14H18O5
4C14H18O4
5C15H20O4
6C14H20O3
7C14H18O3
8C14H18O3
9C15H22O4
10C14H22O4
11C14H22O3
12C15H22O3
13C15H20O3
14C15H20O4
15C15H22O5
16C15H22O5
17C15H22O5
18C15H22O5
19C16H24O5
20C16H24O5
21C16H24O6
22C30H54O4
23C31H52O5
24C42H58O6
PTP1B活性测定：
将鉴定出的化合物加入PTP1B活性测定试剂盒中，结果表明化合物2-（2-羟基乙基）-1-芹菜甲酯（HPE）能够有效抑制PTP1B的活性。其IC50值为9.3μg/mL。抑制曲线如图1所示。
图1HPE对PTP1B的抑制曲线
讨论：
本研究中鉴定出的24个化合物为沙生蜡菊的化学成分，其中包括11个内酯、7个羟基萜、3个醇、2个酸和1个裂片素。这些化合物的分子结构和分子量范围广，其具体的药理作用和作用机制尚待深入研究。然而，化合物HPE被发现具有有效的PTP1B抑制活性，其IC50值为9.3μg/mL，表明其具有很好的潜在治疗糖尿病和肥胖的价值。
结论：
本研究成功鉴定了沙生蜡菊根部的化学成分，并筛选出了一款PTP1B抑制剂。结果表明沙生蜡菊中含有多种化合物，其中化合物HPE具有潜在的治疗价值。这为深入研究沙生蜡菊的药理作用机制提供了科学依据。
参考文献：
1.ZhengX，CuiM，LiuY，etal.ChemicalConstituentsandPharmacologicalEffectsofSaussureainvolucrata[J].JournalofChineseMedicine,2020,35(06):956-961.
2.LianJ,LiB,HuangJ,etal.IdentificationofPTP1BinhibitorycompoundsfromChineseherbs[J].JournalofEthnopharmacology,2014,154(3):852-856.
3.LiZ,YooS,LeeJH,etal.Inhibitorsofproteintyrosinephosphatase1Bfromtheroo