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基于p54蛋白单克隆抗体的非洲猪瘟病毒抗原检测方法的建立的任务书 任务书 项目名称:基于p54单克隆抗体的非洲猪瘟病毒抗原检测方法的建立 项目背景: 非洲猪瘟是一种由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的病毒性疾病,能够感染猪类动物并引起高死亡率。病毒传播具有极高的传染性和致病性,对养猪业产生严重影响。目前,通过病毒核酸检测和抗体检测诊断非洲猪瘟有其局限性。因此,建立一种灵敏度高、特异性强的抗原检测方法就显得非常迫切。 项目内容: 1.确定p54单克隆抗体质量标准,并进行p54单克隆抗体分离与纯化。 2.通过Westernblotting、ELISA等方法对p54单克隆抗体的特异性及灵敏度进行验证。 3.制备并优化ASFV抗原样品,包括原液抗原及经过纯化的抗原。 4.利用经过纯化的ASFV抗原进行抗原检测方法的优化,包括试剂盒的配制及试验条件的优化等。 5.对优化后的抗原检测方法进行评价和验证,并与现有的核酸检测和抗体检测方法进行比较和分析执行。 成果目标: 1.建立一种基于p54单克隆抗体的非洲猪瘟病毒抗原检测方法,并确定方法的灵敏度和特异性。 2.验证该方法的可靠性,并与现有的核酸检测和抗体检测方法进行比较和分析。 3.实现该方法的标准化制备,并通过技术转移推广到疫情较为严重的养猪区域。 计划进度: 阶段一:2021年6月-2021年8月 1.收集相关文献,了解研究进展情况。 2.确定p54单克隆抗体的质量标准,进行抗体的分离和纯化。 3.通过Westernblotting、ELISA等方法对p54单克隆抗体的特异性及灵敏度进行验证。 阶段二:2021年9月-2021年11月 1.制备并优化ASFV抗原样品,包括原液抗原及经过纯化的抗原。 2.优化抗原检测方法,包括试剂盒的配制及试验条件的优化等。 3.对优化后的抗原检测方法进行评价和验证。 阶段三:2021年12月-2022年2月 1.与现有的核酸检测和抗体检测方法进行比较和分析。 2.实现该方法的标准化制备,并通过技术转移推广到疫情较为严重的养猪区域。 项目经费:50万元人民币 项目执行单位及负责人: 执行单位:XXX大学生物学系 负责人:XXX教授 项目评估标准: 1.确定基于p54单克隆抗体的ASFV抗原检测方法的灵敏度和特异性,并与核酸检测和抗体检测方法进行比较和分析。 2.实现该方法的标准化制备,并通过技术转移推广到疫情较为严重的养猪区域。 3.论文发表在SCI期刊上。