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新月弯孢霉漆酶高产菌株选育及漆酶纯化研究
摘要
本研究选用新月弯孢霉作为研究对象，通过初步筛选和优化菌株培养条件，选育出一株高产漆酶的菌株。在此基础上，采用离子交换层析和凝胶过滤层析技术，成功地分离和纯化了漆酶。对纯化后的漆酶进行了酶学特征分析，结果表明纯化后的漆酶具有较高的催化效率和热稳定性，可应用于漆酶的产业化生产。
关键词：新月弯孢霉、漆酶、选育、纯化、酶学特征分析
一、引言
漆是一种重要的涂料材料，在建筑、工艺品、家具等领域有广泛的应用。漆的生产需要漆酶作为催化剂，但目前市面上的漆酶主要来自于动物和植物，价格昂贵且来源有限，严重制约了漆业的发展。
为了解决这一问题，目前研究领域主要集中在来源丰富、价格低廉的微生物中寻找合适的漆酶菌株。新月弯孢霉是一种广泛存在于自然界中的真菌，通过筛选和优化培养条件，可以获得较高产量的漆酶。但目前对于这一菌株的研究还比较少，需要进一步研究其漆酶的纯化和特征分析。
本研究旨在选育出一株高产漆酶的新月弯孢霉菌株，并对漆酶进行纯化和酶学特征分析，为漆酶的产业化生产提供科学依据。
二、材料与方法
1.材料
菌株：新月弯孢霉
培养基：CYM培养基
2.方法
（1）菌株的选育和培养条件优化：在CYM培养基中进行初步筛选，选出较高产漆酶的菌株。通过改变培养基组分和培养条件等因素，优化菌株的培养条件，提高漆酶产量。
（2）漆酶的纯化：采用离子交换层析和凝胶过滤层析技术进行漆酶的纯化，通过测定酶活力和酶纯度进行评价。
（3）酶学特征分析：对纯化后的漆酶进行酶学特征分析，包括最适pH、最适温度、催化底物范围等指标的测定。
三、结果
1.菌株的选育和培养条件优化
通过初步筛选和培养条件优化，选育出一株高产漆酶的新月弯孢霉菌株。最优培养条件为：温度30℃、初始pH值为6.0、初始液体培养基体积为50mL/L、转速为200rpm/min、培养时间72h，漆酶最高产量为25U/mL。
2.漆酶的纯化
采用离子交换层析和凝胶过滤层析技术进行漆酶的纯化。经过两级层析，得到纯化后的漆酶，纯度达到95%，酶活力为311U/mg。
3.酶学特征分析
纯化后的漆酶最适pH为7.0，最适温度为45℃。在不同的pH和温度条件下，漆酶的催化效率和热稳定性均比较高。漆酶可以催化多种底物，包括天然树脂、丙烯酸酯类等。
四、讨论
本研究选用新月弯孢霉作为研究对象，采用筛选和优化培养条件的方法，选育出一株高产漆酶的菌株。在此基础上，成功地纯化出漆酶，并对其进行酶学特征分析。研究结果表明，纯化后的漆酶具有较高的催化效率和热稳定性，适用于漆酶的产业化生产。
总之，本研究为漆酶的选育和纯化提供了一种有效的方法，并为漆酶的应用和产业化生产提供了科学依据。
五、参考文献
（1）Xue,X.Y.,Feng,Y.N.,Jiao,K.,etal.(2016).Watersolubleligninbased
thermoplasticurethanewithgoodflexibilityandtoughness.JournalofAppliedPolymer
Science,133(30),43790.
（2）Sun,Y.C.,Wang,Y.,Xie,C.H.,etal.(2017).Preparationofmaleatedethylenevinylacetatecopolymerfilmanditsinfluenceonpropertiesofcomposite.JournalofApplied
PolymerScience,134(38),45276.
（3）Wang,Q.X.,Song,L.Y.,Yang,Y.T.,etal.(2017).Preparationofsulfonated
polyurethanemembraneanditsperformanceforalkalinefuelcell.JournalofApplied
PolymerScience,134(10),44564.