Sox9基因转染兔骨髓间充质干细胞治疗兔退变椎间盘的实验研究的任务书.docx

Sox9基因转染兔骨髓间充质干细胞治疗兔退变椎间盘的实验研究的任务书
任务书
一、研究目的
随着人口老龄化程度的不断加深和生活节奏的加快，椎间盘退变逐渐成为一个影响人类健康的疾病，而目前对其的治疗手段尚不完善。为了探究更加有效的治疗方法，本研究旨在通过Sox9基因转染兔骨髓间充质干细胞，探讨其在治疗兔退变椎间盘方面的应用价值。
二、研究内容
1.实验对象
选择20只成年兔作为实验对象，进行退变椎间盘模型制作。
2.实验方法
2.1兔椎间盘退变模型的制作
2.1.1在兔的脊柱下方的脂肪组织内注射70%的丙酮来松动脊柱，插入40号针穿过椎间盘中心豆豆上缘刺入椎干，调整位置以避免穿越椎骨。
2.1.2通过X线检查针头位置确定，并通过注射甲氧基硅烷的方法注入动物体内。
2.1.3随机分配实验兔为治疗组和对照组2组，将治疗组注射转染Sox9基因的兔骨髓间充质干细胞，并注射到椎间盘中心，对照组注射生理盐水。
2.2兔骨髓间充质干细胞的转染
2.2.1通过离心、培养和DNA纯化等方法得到兔骨髓间充质干细胞。
2.2.2将含有Sox9基因的质粒DNA用基因枪转染至兔骨髓间充质干细胞中，同时也转染绿色荧光蛋白或红色荧光蛋白进入细胞中以观察转染的效果。
2.3实验观测指标及方法
2.3.1通过MRI检查大、小鼠椎间盘状态；并检查水分、糖极、脂肪化程度。
2.3.2在一定时间内，对椎间盘退变程度、水、蛋白和糖代谢的变化进行连续观察记录。
2.3.3通过统计数据进行分析，了解转染Sox9基因后治疗效果的情况，比较2组实验结果的差异。
三、研究计划
1.研究时间：2022年6月至2023年12月。
2.实验流程：
（1）为实验对象兔进行随机编号和分组；
（2）制作椎间盘退变模型；
（3）兔骨髓间充质干细胞的提取和转染；
（4）进行MRI检查和相关代谢指标的检测；
（5）数据处理和结果分析。
四、实验经费
1.实验所需经费：80万元。
2.经费来源：从学院预算中划拨。
五、实验安全
1.实验过程中要严格按照操作规程进行，避免任何事故的发生。
2.实验过程中对动物进行善待和保护，遵守动物实验的相关法律法规。
3.在实验结束后，对实验动物进行适当的处置和处理。
六、实验预期成果
通过该研究，我们将探究Sox9基因转染兔骨髓间充质干细胞治疗兔退变椎间盘的效果，对椎间盘退变的治疗手段进行探索研究，为临床治疗提供新的思路和方法。