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RNA结合蛋白对可变剪接和非经典翻译的调控研究的任务书 任务书 课题名称:RNA结合蛋白对可变剪接和非经典翻译的调控研究 课题背景 RNA结合蛋白是一类重要的转录后调控因子,它们广泛参与了可变剪接、非经典翻译和mRNA稳定等过程。这些过程都是关键的细胞功能调节机制,对于细胞增殖、分化、发育以及应激反应等方面至关重要。因此,RNA结合蛋白的研究具有重要的生物学和医学意义。 课题任务 本课题旨在通过对RNA结合蛋白的研究,探讨其对可变剪接和非经典翻译的调控作用,并从分子水平阐明相应的机制。具体任务分为以下三个部分: 1.高通量测序分析RNA结合蛋白对可变剪接的调控 使用CLIP-seq技术,筛选出参与可变剪接调控的RNA结合蛋白,利用RNA-seq技术对其调控下游基因的可变剪接进行分析。并在不同发育阶段、不同组织和不同应激条件等情况下,研究RNA结合蛋白对可变剪接的调控变化规律,从而揭示RNA结合蛋白参与可变剪接的分子机制。 2.RNA结合蛋白在非经典翻译中的作用及其调控机制的研究 利用Ribo-seq技术,探究RNA结合蛋白在非经典翻译中的作用,并通过多种生物信息学方法,分析其在翻译水平上的调控途径和分子机制。同时,在细胞培养模型中构建RNA结合蛋白的表达修饰体系,研究RNA结合蛋白对非经典翻译的作用,并系统分析其作用机制。 3.RNA结合蛋白介导的mRNA稳定性调控机制研究 使用PAR-CLIP技术筛选出参与mRNA稳定性调控的RNA结合蛋白,并利用RNA-seq技术分析其对mRNA稳定性的调控作用。通过构建稳定性记者基因和RNA结合蛋白表达修饰体系,从细胞内部分子水平研究RNA结合蛋白的内在调控机制,进而揭示RNA结合蛋白调控mRNA稳定性的分子机制。 课题要求 1.熟练掌握RNA分子生物学实验技术,如RNA结合蛋白的克隆、表达及组蛋白免疫共沉淀等技术,并能独立进行实验和数据分析; 2.熟悉常用高通量测序和生物信息学分析方法,如CLIP-seq、RNA-seq、Ribo-seq和PAR-CLIP及其相关数据分析和挖掘工具,能够进行数据处理、统计分析和模式识别; 3.熟悉细胞培养和转染技术,有较为扎实的实验技能和动手能力; 4.具备良好的团队合作意识和沟通能力,能够按时完成课题任务,并能够撰写高质量的学术论文。 预期成果 1.发表不少于4篇SCI学术论文,其中至少1篇在专业领域重要期刊或高影响因子期刊上发表; 2.在研究领域具有一定的学术声誉和影响力; 3.能够为RNA后转录修饰研究的发展和实践提供有益的经验和借鉴。 参考文献 1.Leietal.RNA-bindingproteinsinangiogenesis:insightsintoclinicalimplications[J].BiomarkerResearch,2020. 2.Heetal.RNA-bindingproteinHuRregulateslivercancerstemcelldedifferentiationandprogression[J].InternationalJournalofOncology,2020. 3.Hassoetal.RoleofRNA-bindingproteinsintheregulationofnoncodingRNAsanddiseasedevelopment[J].CurrentOpinioninOncology,2020. 4.Weietal.Paracanceroustissue-derivedexosomalmicroRNA-320aasliquidbiopsybiomarkerforlungadenocarcinoma[J].JCellBiochem,2020. 5.Jingetal.hnRNPA1inhibitsthemalignancyofhepatocellularcarcinomabymodulatingalternativesplicingofGSK3β[J].ISRNOncology,2020.