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2016年陕西省猪群猪圆环病毒2型与抗体检测及核酸疫苗的研制的任务书 任务书 一、任务背景和目的 猪圆环病毒2型是一种重要的猪病原微生物,它可引起严重的心肌炎、肺炎、腹泻等多种临床症状,导致猪只死亡率高,生产能力下降,猪肉产品的质量和安全也受到严重影响。近年来,猪圆环病毒2型病情呈上升趋势,成为我国猪业的重要疫情之一,对猪业的健康发展和畜产品安全具有非常重要的意义。 为了更好地控制猪圆环病毒2型的流行,我们需要对其在陕西省的疫情进行深入了解,建立起更加科学、完善、有效的监测和防控体系,提高防治猪圆环病毒2型疫情的能力和水平。因此,本次任务旨在对陕西省猪群中猪圆环病毒2型的感染情况和抗体水平进行检测,研制相应的核酸疫苗,为后续的防治和有效控制猪圆环病毒2型的疫情提供科学依据和技术支持。 二、任务内容和要求 1.陕西省猪圆环病毒2型的检测 (1)采集猪群血样或粪样,进行实验室检测,首先根据症状判断是否为猪圆环病毒2型感染,再进行病原学检测,比如实时荧光PCR、酶联免疫吸附测定等。 (2)对检测出的阳性样品进行分离、培养和纯化,通过逆转录PCR、基因克隆和序列分析等手段,鉴定其毒株和基因型,建立起陕西省猪圆环病毒2型疫情的分子流行病学图谱,为疫情监测和防控提供科学依据。 2.陕西省猪圆环病毒2型的抗体检测 (1)采集猪群血样,进行病原学检测,得出阳性结果后,进行抗体测定,比如酶联免疫吸附测定、免疫荧光技术等。 (2)对检测出的阳性血样进行血清中抗体水平的测定,了解不同养殖场、品种、年龄的猪群中抗体水平的差异,为疫苗的研制和使用提供科学参考。 3.核酸疫苗的研制 (1)构建核酸疫苗的重组表达载体,将猪圆环病毒2型的优势表位和重要抗原基因进行克隆和定向突变,并通过体外表达和体内荧光测试确定最佳表达条件。 (2)对重组表达的蛋白质进行纯化和检测,确定其免疫原性和安全性,确定接种剂量,并进行小鼠动物实验,评估其免疫保护效果和副作用。 (3)通过大规模的动物实验,评估核酸疫苗的免疫保护效果和免疫持续时间,制定具体的防疫方案。 三、任务时间和计划 本次任务将分为三个阶段,分别为:疫情调查和检测,抗体检测和核酸疫苗研制。 1.疫情调查和检测:2个月 (1)采集样品和实验室检测:1个月 (2)毒株鉴定和分子流行病学研究:1个月 2.抗体检测:1个月 3.核酸疫苗研制:12个月 (1)重组表达载体构建和突变基因克隆:2个月 (2)蛋白质免疫原性和安全性测试:3个月 (3)小鼠免疫实验和伤寒试验:4个月 (4)大规模动物实验和防疫方案制定:3个月 四、任务组成和职责 1.研究组 研究组主要由研究人员和技术人员组成,负责疫情调查和检测、毒株鉴定和分子流行病学研究、抗体检测和核酸疫苗研制的实验操作和结果分析。 2.管理组 管理组主要由实验室管理人员和项目主管组成,负责制定任务计划和预算、资金管理、人员招募、实验室管理和研究进展管理,保障任务高质量完成。 3.合作组 合作组主要由养殖场、动物实验中心、药品生产企业和部分检测机构组成,为疫情调查和检测、动物实验、药品生产和产品销售等提供协作支持。 五、任务经费和资助来源 本次任务的总预算为1000万元,资金来源包括地方政府拨款、企业捐赠、科技计划项目和其他资金等渠道,任务经费将用于购置实验设备、耗材、动物实验费用、疫苗生产费用、人员工资和业务差旅等方面。 六、任务质量和标准 任务完成后需要达到以下标准和质量要求: (1)疫情调查和检测:样品齐全、数据准确、病原学检测规范,毒株鉴定和分子流行病学研究成果丰富、可靠、具有科学意义。 (2)抗体检测:样品齐全、测定准确、数据清晰、结果可靠,提供疫情防控和疫苗研制的科学依据。 (3)核酸疫苗研制:重组表达载体构建稳定、突变基因克隆成功、蛋白质纯化和检测规范、小鼠和大规模动物实验数据可靠,核酸疫苗免疫保护效果好、稳定、安全。 七、任务影响和社会效益 本次任务的完成,将对陕西省猪业的健康发展和畜产品的质量与安全产生深远影响。通过疫情调查和检测,我们可以了解猪圆环病毒2型的分布情况、流行趋势和危害程度,为疫情的监测和防控提供科学依据。通过核酸疫苗的研制和使用,我们可以有效控制猪圆环病毒2型的疫情,提高猪只免疫保护水平和生产效益,促进猪业的可持续发展。同时,我们的研究成果将为相关科研人员提供参考和借鉴,并在一定程度上推动我国农业生物技术的发展和应用。