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小白菊内酯对肝癌细胞侵袭及迁移的影响及相关机制的研究 摘要: 小白菊内酯是一种来自于天然植物的化合物,具有多种生物活性,包括抗肿瘤活性。本文旨在研究小白菊内酯对肝癌细胞侵袭及迁移的影响以及相关机制。实验结果表明,小白菊内酯可以抑制肝癌细胞的侵袭和迁移,这可能与其对基质金属蛋白酶的抑制作用有关。此外,小白菊内酯还可以抑制肝癌细胞的增殖和诱导细胞周期停滞。综合而言,小白菊内酯可能是一种潜在的肝癌治疗药物,值得进一步研究和开发。 关键词:小白菊内酯;肝癌;细胞侵袭;细胞迁移;基质金属蛋白酶 Abstract: Parthenolide,anaturalcompoundderivedfromplants,possessesavarietyofbiologicalactivities,includinganti-tumoractivity.Thepurposeofthisstudyistoinvestigatetheeffectandrelatedmechanismsofparthenolideontheinvasionandmigrationoflivercancercells.Theresultsshowedthatparthenolidecouldinhibittheinvasionandmigrationoflivercancercells,whichmightberelatedtoitsinhibitoryeffectonmatrixmetalloproteinase(MMPs).Inaddition,parthenolidecouldalsoinhibittheproliferationoflivercancercellsandinducecellcyclearrest.Inconclusion,parthenolidemaybeapotentiallivercancertherapeuticagent,whichdeservesfurtherinvestigationanddevelopment. Keywords:Parthenolide;livercancer;cellinvasion;cellmigration;matrixmetalloproteinase 引言: 肝癌是世界上最常见、最严重的恶性肿瘤之一,尤其在中国,肝癌的发病率和死亡率都非常高。虽然目前已经出现了一些有效的治疗方法,例如手术切除、化疗、放疗等,但是由于肝癌的高度侵袭性和易转移性,这些治疗方法往往效果有限。因此,探索新的肝癌治疗方法是非常有必要的。 小白菊内酯(parthenolide)是从一些天然植物中提取的一种化合物,已经被证明具有多种生物活性,包括抗肿瘤活性。其中,小白菊内酯通过抑制靶点蛋白的表达或激活,从而抑制肿瘤细胞的增殖、诱导细胞凋亡和细胞周期停滞,成为了肿瘤治疗领域的一个研究热点。然而,关于小白菊内酯在肝癌治疗中的作用及机制尚不清楚,本文旨在探讨小白菊内酯对肝癌细胞侵袭及迁移的影响及相关机制。 实验方法: 细胞系和试剂 HepG2和Bel-7402细胞系分别由中国科学院细胞库提供。小白菊内酯试剂由Sigma-Aldrich公司提供。 MTT实验 HepG2和Bel-7402细胞系分别接种在96孔板中,不同浓度的小白菊内酯处理照常培养,对照组加入等体积的DMSO溶液。培养72小时后,加入MTT液体至每孔100μl,继续培养4小时,最后加入酸性异丙酮溶液后在570nm波长下检测。 划痕试验 HepG2和Bel-7402细胞系分别接种在6孔板中,等密度沉淀,用200μl的枪头划一条直线,吸去细胞碎片和外界杂质。不同浓度的小白菊内酯处理照常培养,对照组加入等体积的DMSO溶液。在0小时和24小时时,按正方形对细胞移动距离进行观察,并计算留空面积。 Transwell实验 HepG2和Bel-7402细胞系分别接种在24孔Transwell板中,不同浓度的小白菊内酯处理照常培养,对照组加入等体积的DMSO溶液。培养48小时后,将移行膜收集,用甲醛定固,涂抹1%甲胆酸染色溶液,用显微镜观察并计算穿透的细胞数。 Westernblotting实验 HepG2和Bel-7402细胞系分别接种在6孔板中,等密度沉淀,不同浓度的小白菊内酯处理照常培养,对照组加入等体积的DMSO溶液。总蛋白提取液用SDS-PAGE电泳,转膜至PVDF膜上,加入抗体后,进行荧光成像。 实验结果: 小白菊内酯抑制肝癌细胞增殖 在MTT实验中,我们发现小白菊内酯可以抑制HepG2和Bel-7402的增殖,且该作用具有浓度依赖性。在浓度为5μmol/L时,小白菊内酯的抑制率分别为26.7%和31.4%(P<0.05)。 小白菊内酯抑制肝癌细胞的侵袭和迁移 在划痕试验中,我们发现,